冠状病毒所到之处无不令人闻风丧胆，咳咳咳~可能过了一点，不过，草木皆兵，惊弓之鸟这些词也是没跑了。举个例子，你突然感到头晕恶心想吐，或者咳嗽的厉害，再配合体温表一看，38.3°，然后你不会怀疑世界，你只会怀疑自己是不是感染了新-冠...
事实上，这不是你，或者一小撮人的经历，人都是吃五谷杂粮长大的，偶尔感个冒发个烧也挺正常的，以至于在新-冠突然风靡全-球以后，很多人出现了Covid-19的体征和症状，不过检测结果呈阴性，即使没有出现在确诊数据中，也还是可怕的，你有没有想过，问题或许出现在检测上。
那么接下来，如果有一种比现行标准方法更准确的检测方法，那可就太好了。
COVID-19假阴性：
假阴性是研究人员和临床医生在使用当前标准的SARS-CoV-2病毒RNA提取方法时面临的zui大挑战之一。
通过鼻咽拭子或其它样本采集方法采集到样本后，将其存储在病毒运输介质（VTM）或通用运输介质（UTM）中。这就是挑战的开始。培养基常常不能有效地保存病毒RNA，因为它只能在室温下稳定临床样本中的病毒RNA长达3天。这导致病毒RNA的快速降解/碎片化。此外，对于**处理，VTM/UTM不能使样品无传染性。
病毒RNA碎片化为何那么重要？目前的RNA提取标准（基于二氧化硅磁珠的技术）不能有效地捕获高度片段化的RNA。这是由于基于二氧化硅的技术倾向于结合更大的RNA序列。如果未完全捕获片段化的病毒RNA，则在基于qRT-PCR的检测中产生假阴性COVID-19结果的可能性将大大提高。
COVID-19 RNA提取方法的比较研究：
这与COVID-19标准化工作流程中的病毒RNA提取方法不一致，因此Norgen团队进行了一项研究，将Norgen的提取方法与基于二氧化硅磁珠的技术进行了比较。目的是确定在捕获SARS-CoV-2片段化病毒RNA的敏感性方面，不同的RNA提取方法是否存在差异。从Boca Biolistics（FL, USA）采购了44份临床鼻咽拭子样本。使用FDA / EUA批准的PerkinElmer?SARS-CoV-2实时RT-PCR检测方法，对样本进行预筛选，确认44份样本为SARS-CoV-2阳性。
二氧化硅OR碳化硅？
研究了两种RNA提取方法在检测上述44种临床样品中检测SARS-CoV-2病毒RNA的准确性方面的效率。
种方法是提取病毒RNAzui常用的方法，传统的基于二氧化硅磁珠的技术（Zymo Research的Quick-DNA / RNA Viral MagBead）提取病毒RNA。第2种方法是基于碳化硅的提取方法（Norgen唾液/拭子RNA纯化试剂盒）。
什么是zui佳的RNA纯化技术？
到这里事情逐渐变得有趣起来。使用这两种方法提取RNA，并使用Norgen的2019-nCoV TaqMan RT-PCR Kit（Cat. TM67100）进行qRT-PCR检测，针对CDC推荐的3个基因（N1、N2和RP）。
当比较两种方法的qRT-PCR数据时，我们发现基于二氧化硅磁珠的提取方法对SARS-CoV-2真阳性样本的假阴性率为25％。在另一方面中，和基于二氧化硅磁珠的方法相比，基于碳化硅的提取方法产生了对SARS-CoV-2样本的100％的真阳性率和更一致的Ct值。这些结果清楚地表明假阴性结果可以通过使用基于Norgen碳化硅（SiC）的技术而不是传统的基于二氧化硅的技术来进行避免。
如何改进COVID-19检测中RNA提取流程？
碳化硅是一种新型的RNA提取技术，具有出色的RNA结合亲和力——特别是对小的、高度降解的RNA片段，如病毒RNA。碳化硅对所有RNA序列具有一致的结合亲和力，对GC的含量或大小没有偏见。此外，碳化硅不需要任何载体RNA或诸如苯酚/氯仿之类的有害化学物质。
这意味着什么？
检测实验室必须使用zui准确的技术，以确保可靠报告SARS-CoV-2病毒感染情况。基于标准二氧化硅磁珠的提取方法可能不是检测SARS-CoV-2zui准确的方法，正如在研究中看到的，假阴性率为25%。
现在是对整个筛查工作流程的质量进行评估的时候了——从采集生物样本，到病毒RNA提取，再到SARS-CoV-2检测——以zui终保护全球人口的健康和**。
文章来源：https://www.amyjet.com/featured/sars-cov-2-rna.shtml