MULTIPLE HOMOGENIZER多重均质器|Burkard总代理

用于快速制备供**分析和电泳分离法使用的组织样本
参考：R. H. ffrench-Constant/A. L. Devonshire, Biochemical Genetics, Vol. 25, Nos. 7/8, 1987.
 

MULTIPLE HOMOGENIZER多重均质器|Burkard总代理（*初设计用于昆虫样本）可以同时制备96个组织样本，将均质化的时间减少了10倍。这样一个人***多就可以制备3000个用于**分析的样本。

较早的方法耗时耗力，其使用带有紧密排列玻璃棒的标准微离心管。当量化形成蚜虫对杀虫剂抵抗力的酶的活动时，这些方法限制了样本的制备规模。

图中展示了**的部件和组装方法。将缓冲剂和样本装入微型培养皿的井内，然后插入复式杵并按圆周手动旋转。

经过上述过程并小心拔出杵后，丢失的量只有5 μl，而这与均质量无关。因此，当分别用10 μl和50 μul进行均质化后，可靠恢复的样本分别为50％和90％。

分析过程所需的其他设备包括：专门的电泳凝胶体梳（与微型培养皿的坑相对应）、8个位置的复吸液管、电泳柜和供电装置。

用于快速制备供**分析和电泳分离法使用的组织样本的多重均质器
Alan Devonshire

对诸如昆虫等小生物体进行的群体遗传学研究需依靠电泳或**分析技术，其要求对众多个体进行分析方可保证结果的代表性。用于电泳分析的昆虫样本通过各种均质器进行均质化，比如带有紧密排列的玻璃棒的聚丙烯微离心管。但是对单个昆虫均质化后，利用微量注射器加载凝胶体的工作是整个分析过程中*耗时耗力的部分。当**分析发展到要量化形成蚜虫对杀虫剂抵抗力的酶的活动时，这种样本制备方法的局限性就变得更加明显了。

因此我们设计了可装入标准**培养皿的多重均质器，其可以同时均质96个单独样本以用于**分析和电泳分离（ffrench-Constant & Devonshire, Biochemical Genetics, 25, 493－499（1987））。

该均质器由10mm厚的塑料玻璃衬板制成，大小与**培养皿类似。在均质器内有96个塑料玻璃棒按9mm的间距排列，与**培养皿内的96个井准确对应。棒尖是水平的，与井的水平底部正好一致。

样本被装入**培养皿井内的缓冲剂中，插入均质器并手动旋转后将其均质化。4mm直径的棒较为理想，因为这样即可以有效均质化又可以在装配后在井内留下足够的量（200 μl）。

要想确定均质化过程中“丢失”的数量，可将不同量（10－200μl）的PBS/Tween以及蔗糖和溴甲酚紫放入**培养皿的8个井中，在经过插入、旋转、和拔出均质器的杵后，利用复吸液管确定8个井中可以取回的样本量。假设均质器是小心拔出的，那么不管经过均质的样本量如何，丢失的量均为 5μl。这样当别对10μl和50μl进行均质时，可靠恢复的样本分别占50％和90％，涵盖了对小生物体使用电泳分离法时的典型数量范围。

如果要使用8通道复吸液管将样本直接从**培养皿装入盛有电泳分离凝胶体的井内，则需要使用间隔为4.5或9mm的带井梳。针对这一目的制作的间隔 4.5mm的梳（可从Burkard Scientific购得）可以通过仅使用8通道吸液管的7个尖分两次来填充不同的井，从而将**培养皿的两行14个样本装载到Pharmacia GE-2/4设备（厚3mm，宽72mm）的每个凝胶体上。这样在一个电泳箱内就可以一次分析56个样本。尽管吸液管尖过大，不适合Hoffer设备的 1.5mm凝胶体井，但也成功地使用该复吸液管将样本装入这种设备中（15井的梳，编号：SE 511－15，间隔9.1mm）。

从粉虱（50μg）到家蝇（20mg）的昆虫都可以被成功均质化，但仅对蚜虫（约400μg）进行过功效定量评估，用于通过**分析研究形成蚜虫对杀虫剂抵抗力的酶。使用多重均质器制备的蚜虫样本与与通过微型离心管制备样本的相比，其得到的酶活动更明显（P<0.001），差异也更小（P<0.001）。

除了更有效的均质化外，样本制备时间也只有采用微离心管进行单独均质化所需时间的1／10。系统其他节省时间的方面包括：**培养皿的井浅并且带编号，故记录样本装载数据更容易；样本存储于堆在冷冻机内的培养皿内；以及使用复吸液管进行液体处理。如有可用于微型培养皿的离心机，则在分析前就可以去掉组织残片。

随着**分析在调查和诊断研究中作用的提升，该快速样本制备技术对于与培养皿井内的可用量（10－200μl）一致的组织将会有很多生物和医学方面的应用。若选用适当的梳，则该技术也将非常适用于电泳分离研究。假设在梳井间隔方面没有其他限制，那么生产商应考虑采用标准的4.5或9mm间隔，这样复吸液管就可以在样本制备和装载中得到更广泛的应用。

广州市赛拓仪器科技有限公司为英国Burkard中国区域总代理，代理英国Burkard公司所有产品，包括Potter喷雾塔，孢子采集器，微量施药器，Tullgren漏斗，UNIVAC昆虫捕捉器，JOHNSON-TAYLOR昆虫捕捉器，植物繁殖隔离器，Vortis昆虫捕捉器等。

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