怎样区分死体积和驻留体积？

死体积是 HPLC 系统从注射点到检测点之间的体积，不包括色谱柱。
因此，它包括进样体积、进样器体积、色谱柱前后连接管的体积、末端接头和筛板的体积以及检测器流通池的体积。
死体积可以通过用零死体积连接器更换色谱柱来测量。
通过注入非常少量的样品，可以测量从注入时刻到*大峰高之间的时间。
这个时间乘以流速可以很好地估计系统死体积。

驻留体积

驻留体积负责梯度的时间延迟。
根据定义，它是混合室和色谱柱入口之间的梯度 HPLC 系统的体积。
这个体积在等度洗脱下当然也存在，但在这种情况下，它对分离没有影响。
它包括梯度混合器的体积、泵的连接管道、泵头和止回阀、泵和进样器之间的管道、进样器本身以及进样器和色谱柱入口之间的管道。
启动梯度时，在梯度通过驻留体积之前，色谱柱不会改变洗脱液成分。
在此期间，色谱柱在等度洗脱下操作。
将梯度方法从一台仪器转移到另一台仪器时必须注意。
如果驻留体积不同，即使方法和色谱柱相同，保留时间也可能不同。
驻留体积可以通过运行从 100% 甲醇到 100% 甲醇 + 10 mg/L 苯乙酮的阶梯梯度来测量。
UV 检测器将检测到 S 形迹线。
驻留体积等于进样和检测器迹线半高之间的时间乘以流速。