光学显微镜分析
光学显微镜是光学仪器的一大类。它由荷兰科学家胡克发明了三百多年。主要用于微小物体的观察和操作。经过数百年的不断发展,现已发展成为生物、立体、金相、测量四大类产品。同时结合各项技术成果,摄影、摄像、共焦扫描、荧光、偏振、暗场、相衬等一系列变形产品。光学显微镜广泛应用于生物、基因工程、新材料、微电子、工业测量、微机械、刑侦、医疗、教学等领域的科学研究和制造过程中。 一、工作原理 1.光学显微镜利用光波(电磁波的一种光谱:可见波长范围为:400nm~700nm:近紫外区为300nm~400nm:近红外区为700nm~1500nm。)根据该原理研制的光学成像仪器折射成像或反射折射成像。但由于光波长的限制,常规光学显微镜在可见光波段的有效放大倍数约为1600倍,超过1600倍的放大倍数无助于光学系统分辨率的提高。 2 显微镜一般由物镜系统、棱镜系统、目镜、调焦机构、照明系统、支架、工作台等几部分组成。 3、基本原理是:显微镜物镜放大试样的像(一次成像),显微镜目镜对物镜形成的像进行二次大成像(二次像),成像在无限远或人眼的清晰视觉距离。然后通过观察者眼睛的光学系统将“二次图像”成像在人眼的视觉网络模型上,就可以在大脑中获得标本的显微图像信号。 4、光学显微镜的总放大倍数:β总=β物体×β眼(其中:β物体为物镜放大倍数,β眼球为目镜放大倍数)。 如果显微镜装有摄像装置,则摄像装置放大倍数的计算公式为:β总=β物体×β眼β镜头(其中:β镜头是相机或相机接口中光学系统的放大倍数设备)。 二、产品分类 2. 立体显微镜 (1) 立体显微镜顾名思义就是具有立体视觉的显微镜,也叫实体显微镜。其主要结构特点是:光学系统必须有左右两条“光路”分别对试样成像,左右“光路”之间必须有一定的夹角(称为体积视角,一般在10°~12°范围),模拟人眼睛观察有限距离物体形成立体视觉时的状态,便于在显微镜物侧(物镜前简称)的空间定位或显微镜下的标本操作。因此,体视显微镜广泛应用于科研和生产过程中的各种显微操作场合,成为不可缺少的工具(克隆技术中的细胞显微操作、集成电路引线键合与封装、医疗显微外科等),具有广阔的市场。 (2)根据体视显微镜的结构,分为定倍率体视显微镜、间隔变倍体视显微镜和连续倍率体视显微镜三种。它们属于低端、中端和中端产品,适用于不同的场合。为了满足记录和传播标本显微镜图像的要求,有具有摄影和成像功能的体视显微镜,简称“三目体视显微镜”,它可以通过摄影和摄像连接各种相机、摄像机和数码相机。视频接口。 (3)由于体视显微镜的应用特点,一般产品的放大倍数范围为:2X~200X。有些进口产品已经达到了400X以上,但是放大到200X以上后,因为“光学景深”(通过光学系统观察到的试样的深度)太短,仪器没有立体视觉,但是仅用作一般的平面放大倍数。 (4)体视显微镜的主要技术指标有:放大倍率和放大倍数范围、视场直径、物体工作距离、物镜变倍比(连续变倍体视显微镜)等。 (5) 组件配置及通用参数 ①附加物镜: 0.3X、0.5X、0.7X、1.5X、2.0X、2.5X为常用规格。 具有平行光路的产品具有 1.0X 物镜。根据特殊要求,还可开发、设计、制造特殊规格的附加物镜。 ②目镜系列: 10X、15X(16X)、20X、25X为常用规格。 另外,为了适应戴眼镜观察,还有“高眼点目镜”;视场角大于45°的目镜称为“广角目镜”。还可根据应用要求设计制造特殊规格的目镜。 (6)由于体视显微镜的应用范围很广,操作和使用的要求也有很大差异,为了充分发挥其使用效率,提高工作效率,有多种附件可供选择。 ①光源: 光源支架(带外卤素灯和透射荧光灯或卤素灯),可调节卤素灯(50W)、环形荧光灯、光纤冷光源(不允许红外辐射的场合可配单端、双端、环形等光纤)、LED光源、偏光装置、暗场集中装置(用于宝石、透明矿物等标本的签名) ②支持系统: 单横杆万向支架、双横杆万向支架、摆臂平衡万向支架、微动支架 ③移动平台: 2 二维平移工作台、三维移动工作台(可倾斜,加1个旋转轴)、集成电路晶圆检测工作台、测量工作台(X、Y方向10MM行程、0.01MM度数) ④测量微分尺: 目镜标线(0.1MM~0.05MM格值、“一字”、“一字”、“十字”、“格”等)物镜标线(0.01MM格值) ⑤显微镜摄影摄像装置: 袖珍变焦数码相机接口、单反数码相机接口、35MM单反相机接口、工业CCD相机接口、DV相机接口。 2、生物显微镜 (1)生物显微镜主要用于观察动物和植物组织切片、细胞和细 菌涂片等标本的精细组织结构。随着生物工程和基因工程的发展,它也是胚胎移植和克隆技术的重要工具*。生物显微镜主要追求*高细节分辨率、有效放大倍数、更宽的视场直径等技术指标。 (2)生物显微镜常规结构: ①透射式正置显微镜:是一种常用的方法,其中低端流行的有双目和单目两种型号; ②透射反射照明正置显微镜:一般为研究或研究产品; ③透射照明倒置显微镜:可以通过玻璃培养皿底部观察活性生物组织或细胞的状态,可以对这些活性生物组织或细胞进行显微操作: ④透射反射照明倒置显微镜:用途与透射照明倒置显微镜基本相同,但也可以观察不透明的标本。 ⑤根据应用场合,生物显微镜大致可分为:大众型(均采用消色差物镜)、中档产品(可选平面消色差物镜、照相摄像装置,可加反光照明等装置)、研究型产品(基本配置平面消色差物镜或平面复消色差物镜、摄影机接口、反光照明装置、荧光灯、偏光、暗光、相衬等功能部件可选). (3)生物显微镜的主要组成部分有: 支架、移动台和样品架、调焦机构、物镜转换器(根据安装物镜数量有3孔、4孔、5孔、6孔等)、观察系统(分单目、双目、三目、包括3种相机接口)、照明系统(包括聚光镜、照明、电源和调光电路等)、目镜等。 由于生物显微镜产品标准化程度高,国内不同厂家的中低端产品的主要区别在于光学系统的质量和外观。 (四)生物显微镜的主要技术指标和指标 ①放大倍率和放大倍率范围:40X~1600X(常规范围); ②目镜视场直径:10X目镜一般为φ18MM~φ22MM,进口产品已达到φ26MM: ③物镜规格:4X、10X、40X、100X为常规规格(100X物镜通常为“油镜”,以获得精良的分辨率,即镜头与样品前的“数值孔径”物镜,从而提高物镜分辨率,外观标有“OIL”),除2X、20X、25X、50X、60X、90X等规格外,物镜放大倍数以不同外观“色圈”和数字: ④物镜品种:消色差、平场消色差、平场消色差、相衬、暗场
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