液相色谱有两个重要的数据:保留时间和峰面积。其实色谱图就是一张横轴是保留时间,纵轴是峰面积的图谱。
保留时间是物质的特征峰,是确定物质组分的重要数据,一般来说色谱图上的一个色谱峰对应着一个物质。
比如这张图,进样分析后发现4.0133min的色谱峰是土霉素,9.7437min的色谱峰是金霉素。那么按照这样的方法测定,4min左右的色谱峰就都可以默认为是土霉素,9.7min左右的色谱峰就都是金霉素了。
峰面积,测量参数,是计算含量时的重要数据。同一种物质,浓度和峰面积成正比。也就是所谓的线性关系。
注意,前提是同一种物质。如果说横轴是浓度,那么纵轴是峰面积,它们的关系可以由这个线性关系图表示。
假如我配置了一个浓度是1mg/ml的土霉素标准溶液,然后进样分析,测得土霉素的峰面积是100的话。那么我测定另外一个未知物质,该物质4min出峰,峰面积是1000,就可以默认为未知物质是土霉素,浓度时10mg/ml。
除此之外液相还有一些其他的参数,比如常见的分离度和理论塔板数。
分离度:是判断物质分离情况的一个参数,通常认为分离度大于1.5,两个色谱峰算是分开了。
理论塔板数:表示色谱柱的柱效的参数。除另有规定外,色谱峰的理论板数不得低于2000.
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