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液相色谱仪分析中色谱峰拖尾的原因分析
液相色谱仪分析中色谱峰拖尾的原因有色谱柱被污染、柱外死体积、样品过载、样品溶剂过强、组分共流出、流动相pH值在样品pKa附近和填料表面惰性不好等。
一、色谱柱被污染:
如果色谱柱开始使用时峰形正常,使用一段时间后逐渐出现峰拖尾,则色谱柱被污染的可能性很大。这时需要对色谱柱加强冲洗,即使用比方法流动相更强的溶剂冲洗色谱柱。
建议做好样品前处理,但如果前处理后依然比较脏,强烈建议配置保护柱。一旦峰形变差,柱效下降,应及时更换保护柱芯。
二、柱外死体积:
较大的柱外死体积会导致峰形展宽和峰拖尾,建议仔细检查样品经过的所有管路和各连接部位,使用合适的管线和接头。
三、样品过载:
减小进样体积或稀释样品。
四、样品溶剂过强:
样品溶剂强度应不高于流动相洗脱强度。使用流动相溶解样品或使用比初始比例流动相洗脱能力更弱的溶剂溶解样品。
五、组分共流出:
如果一小峰包含在一大峰的后面,需要做好色谱条件的优化,有条件时可利用PDAD检查峰纯度。
六��流动相pH值在样品pKa附近:
流动相pH值在样品pKa附近时,样品解离平衡不充分,容易出现前沿峰或拖尾峰,所以流动相pH值应尽量选在样品pKa±1.5以外。
七、填料表面惰性不好:
键合硅胶型填料表面的残留硅羟基或金属杂质易与待测化合物发生二次作用而导致拖尾。建议:
1、选用高纯硅胶合成填料的色谱柱和进行了有效硅羟基封端填料的色谱柱。
2、降低流动相pH值,抑制硅羟基解离。
3、流动相中添加减尾剂,如三乙胺。
4、使用不同的有机溶剂。
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