LC-10Avp型液相色谱系统的日常使用与维护
设备名称:高效液相色谱
厂家型号:岛津公司LC-10Avp
系统组成:本系统由DGU-12A脱气机、2个LC-10ATvp溶剂输送泵(分为A、B泵)、柱温箱、SPD-10Avp紫外-可见检测器、ELSD 2000ES蒸发光检测器(Alltech)、SCL-10Avp系统控制器、LC Solution工作站等组成。
1.仪器的使用
1.1使用前的准备
检查仪器的使用登记记录,了解前一次的使用情况是否处于正常状态。上机操作人员需认真阅读本标准操作程序,并经上机前操作培训,了解仪器的工作原理,熟知注意事项,在掌握基本操作后,才能上机。
使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相,用合适的0.45μm滤膜过滤(有机相和水相分别选用各自的专用滤膜),超声脱气20min以上待用。
根据待检样品的需要选用合适的色谱柱(柱进出口方向应与流动相流向一致)和定量环。配制样品和标准溶液,用合适的0.45μm的样品过滤器过滤后待用。检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
1.2开机
接通电源,依次开启A泵、B泵、检测器、系统控制器,待泵和检测器自检结束后,打开电脑显示器、主机,启动工作站软件。
1.3排气
先把吸滤头放入流动相瓶中;
逆时针转动泵的排液阀180°,打开排液阀;
按purge键,pump指示灯亮,泵大约以9.9ml/min的高流速冲洗,3min(可设定)后自动停止,一般视管路无气泡即可;
将排液阀顺时针旋转到底,关闭排液阀。
1.4启动工作站
在桌面双击LC Solution图标,选择系统1连接SPD-10Avp紫外-可见检测器,系统2连接ELSD 2000ES蒸发光检测器。
默认用户名为Admin,点OK后进入在线系统,此时系统自动连接仪器,仪器发出蜂鸣声,表示连接成功,出现在线控制主界面。
1.5进样
方法编辑好保存后,点击“Acquisition”中的“Download”按钮,发送方法到仪器,点击工具栏中的按钮,将仪器打开,此时泵、检测器都开始按方法中的设置运行。待色谱柱平衡好,检测器基线平稳后即可做样。
点击“Start”图标进入手动进样设置,所有样品信息输入完毕,检查无误后,点击“OK”开始手动进样。
将进样针插到进样阀的底部后,逆时针旋转到底,进样品后迅速顺时针旋转到底,然后拔出进样针,系统开始自动运行、记录数据。
1.6清洗系统和关机
手动进样阀清洗:用注射器吸20ml超纯水后套上冲洗头,将清洗头轻轻顶在进样口上(不宜用力太大,否则容易损坏进样口),使进样阀保持在Inject位置,慢慢将水推入,水将通过注射针导入口、引导管、注射针导入管和注射针密封圈,由样品溢出管排出。
泵头手动清洗:用注射器吸入20ml超纯水后,套上针头,插入泵头清洗管,推入超纯水,另一端流入废液杯,重复2~3次即可。
色谱柱清洗:使用合适的流动相冲洗6个柱体积以上后把流速设为零,然后关闭所有仪器设备,顺序为:先退出工作站软件,再依次关闭系统控制器、检测器、泵、柱温箱,然后关闭总电源离开实验室。
1.7填写使用记录。
2.维护与保养
2.1如果使用前色谱柱中保存的流动相为纯甲醇或纯乙腈,而新流动相中含有缓冲盐时,应先用纯水冲洗色谱柱十分钟左右再使用流动相,以免盐析出损坏系统。
2.2如系统为正相和反相交换使用,应先将所有管路用异丙醇清洗后再更换新流动相使用。
2.3经常保持仪器清洁,请使用中性洗涤剂或无水乙醇浸湿的棉花擦洗。注意,不要让液体渗到仪器内部。擦完后,再用一块干燥的棉花擦干。
3.注意事项
3.1流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水,酸碱液及缓冲液需经过滤后使用,过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围。
3.2水相流动相需经常更换(一般不超过2天),防止长菌变质。
3.3如所用流动相为含盐流动相,反相色谱柱使用后,先用水或低浓度甲醇水(如5%甲醇水溶液),再用甲醇冲洗。
3.4使用手动进样器进样时,在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒,洗针液一般选择与样品液一致的溶剂,进样前必须用样品液清洗进样针筒3遍以上,并排除针筒中的气泡。
3.5使用的流动相应与仪器系统的原保存溶剂能互溶,如不互溶,则先取下上次
的色谱柱,用异丙醇冲洗过滤,进样器和检测器的流通池也注入异丙醇进行过渡,过渡完毕后,接上相应的色谱柱,换上本次使用的流动相。
3.6压力表无压力显示或压力波动时不能进行分析,应检查泵中气泡是否已排除,各连结处有无漏液,排除故障后方能进行操作。
3.5使用者须认真履行仪器使用登记制度,出现问题及时向老师报告,不要擅自拆卸仪器。未经操作培训,不得擅自使用仪器。