您好,欢迎来到仪表展览网!
请登录
免费注册
分享
微信
新浪微博
人人网
QQ空间
开心网
豆瓣
会员服务
进取版
标准版
尊贵版
|
设为首页
|
收藏
|
导航
|
帮助
|
移动端
|
官方微信扫一扫
微信扫一扫
收获行业前沿信息
产品
资讯
请输入产品名称
噪声分析仪
纺织检测仪器
Toc分析仪
PT-303红外测温仪
转矩测试仪
继电保护试验仪
定氮仪
首页
产品
知识
专题
词条
品牌
资料
展会
成功案例
网上展会
词多 效果好 就选易搜宝!
基洛生物栈
新增产品
|
公司简介
注册时间:
2013-01-09
联系人:
电话:
Email:
首页
公司简介
产品目录
公司新闻
技术文章
资料下载
成功案例
人才招聘
荣誉证书
联系我们
产品目录
**生物学
标签抗体
蛋白提取试剂盒
生物化学试剂
蛋白酶
生物缓冲液
仪器设备及配件
不锈钢细胞筛
生化试验耗材
肖特蓝盖玻璃瓶
超滤管
实验室透析用品
微量透析袋(透析装置)
即用透析袋
透析管
普通透析袋
细胞生物学
胶原酶
国产细胞因子
以色列BI现货
当前位置:
首页
>>>
技术文章
>
技术文章
TUNEL原位细胞凋亡检测操作程序
TUNEL
一、材料:
原位细胞凋亡检测试剂盒(美国
ROCHE
公司出品)、
DAB
检测试剂盒
二、操作程序
①
石蜡包埋的切片的预处理常规脱蜡脱水
②
用蛋白酶K(20μg/ml溶于Tris/HCl中,Ph7.4~8.0)室温孵育15~30分钟。37度孵育15分钟。PBS洗2次
③
标记:PBS冲洗2次,擦干样品周围的水,滴加50ul的TUNEL反应混合溶液,在湿盒中37℃孵育60分钟(为防止蒸发和保证TUNEL 反应混合物均匀分布,在孵育过程中加盖盖玻片)。PBS冲洗3次,至此样品可在荧光镜下分析结果。
④
信号转化和分析:擦干样品周围的水分,加入50ul转化剂-POD,在湿盒中37℃孵育30分钟(为防止蒸发和保证转化剂-POD均匀分布,在孵育过程中加盖盖玻片)。PBS冲洗3次,加入50~100μl DAB底物溶液,室温孵育10分钟,PBS冲洗3次。
⑤
苏木素复染细胞核,封片,在光镜下图象分析:选择有意义的组织相,经登录、编号、采集、分析、读取数据、*后存盘。
注:对照(条件允许或自认为有必要的情况下):
阴性对照:
经过固定和通透的细胞样品加入
50
μ
l
试剂
2
以代替
TUNEL
反应混合物,从标记步骤以下同上。
阳性对照:
经过固定和通透的细胞样品用**的核酸酶或
DNase
I
使之产生
DNA
链缺口,从标记步骤以下同上。
仪器设备
一、显微镜:日本奥林巴斯
BX51T-PHD-J11
二、CMOS:
日本奥林巴斯
三、
多功能真彩色细胞图象分析管理系统:
美国Media Cybernetics 公司Image-Pro Plus
四、
切片机:德国莱卡RM2015
五、离心机:北京离心机厂LDZ5-2型
六、电子天平:瑞士METTER AE100型
七、移液器:德国EPPENDORF
八、干燥箱:日本三洋MIR-153型
九、低温冰箱:日本三洋MDF-382E型
十、恒温水浴箱:江苏太仓医用仪器厂DSHZ-300型
十一、医用微波炉:浙江临安爱迪仪器厂YWY781B型
上一篇:
**蚀纹病毒蛋白酶,国产现货,质量*好,TEV Protease(说明书)
下一篇:
HRP标记标签抗体,国产现货,促销中……
若网站内容侵犯到您的权益,请通过网站上的联系方式及时联系我们修改或删除