【性能特点】
传统蛋白分析的实验技术主要是蛋白印迹,由于操作步骤多,操作繁琐,每一步的失误都会造成全盘失败,从而重复实验,对于珍贵样品,更是要倍加小心。另外,试验流程长,结果重复性差,要达到好的实验结果,成本也会很高。同时,传统的蛋白印迹实验技术无法实现准确定量,充其量是半定量。
Wes系统采用革新的Simple Western技术,颠覆30多年传统的Western Blot方法,实现在同一根样品管中完成样品分离、捕获、固定,**检测和定量分析。
1、不用制胶和跑胶,不用转膜,减少实验步骤,避免样品损失。
2、自动进行一抗二抗孵育和化学发光检测,自动进行结果分析,有效提高检测结果的**性和重复性。
3、单个样品上样体积3-5ul,节约珍贵样品和抗体。
4、一次运行时间3个小时,快速高效。
5、检测灵敏度高,低至pg级。
6、实验完成后自动给出详尽的分析数据,包括目的蛋白大小、信噪比、峰面积和含量。
7、可对结果自动进行**的定量分析。
Simple Western系统作为一个划时代的蛋白质分析新技术,自从2011年底推出以来,获得了广泛好评和认可,Nature Methods率先报道该技术。目前全球重要的研究机构大多已经拥有该技术平台,如约翰霍普金斯大学、哈佛大学、斯坦福大学、耶鲁大学、加州大学戴维斯分校、加州大学圣地亚哥分校、华盛顿大学、Massachusetts General Hospital 、Mayo Clinic、Southwest Hospital、美国CDC、FDA。其中NIH有5台、National Cancer Institute有4台,Columbia University有4台、美国默克制药有12台、阿斯利康有7台、德国Charite University有4台。
【蛋白定量检测】
Add your samples and primary antibody or labeling reagent to the pre-filled assay plate. Pop in Wes' capillary cartridge and load the plate. Push start and in just 3 hours get quantitated size-based separation data on up to 25 samples. After the run, toss the used cartridge and plate and you're done.
Figure 1. Total Protein detection (left) and Immune detection (right) of decreasing concentrations of DNAK in Hela
lysate and negative controls (15, 7.5 and 3.75 µg/mL in the total protein assay; 0.015, 0.0075 and 0.00375 µg/mL in the
immunoassay).
Figure 2. GST-labeled AKT was used to generate a standard curve for quantitation of endogenous AKT. AKT-GST was spiked into the Jurkat lysate at decreasing concentrations (250–0 pg/µL) and both the labeled and endogenous proteins were detected using an AKT1 monoclonal antibody. Linear regression
analysis was performed and the endogenous concentration of AKT in the samples was calculated as 21 pg/µL.
【技术指标】
1、功能与应用:可自动进行各种蛋白质样品分离、**检测、定性和定量分析,广泛应用于蛋白质性质鉴定、蛋白质定量分析、蛋白质功能研究、蛋白质修饰和差异表达研究、抗体研究等多个领域;
2、全自动:蛋白样品上样后无需任何人工操作,自动完成Western Blot分析
3、总运行时间:≤3个小时
4、样品总蛋白量:≤5ug
5、样品上样体积:≤5ul
6、加样:机械手自动完成25个样品的加样
7、分离方式:根据分子量大小分离,自动识别蛋白大小并完成分离
8、分离过程:30秒采集一次数据,实时监测分离过程
9、制胶:无需制胶过程,减少操作程序,避免污染
10、固定时间:200秒,蛋白分离后自动固定到样品管壁上
11、转膜:无需转膜步骤,不用担心转膜效率,避免样品损失,提高蛋白质定量结果的准确率和重复性
12、抗体孵育:自动完成一抗二抗孵育和清洗
13、检测方法:化学发光法
14、样品数量:≥25个
15、样品管规格:长125px,内径100um,总体积400nl
16、进样体积:40nL
17、灵敏度:pg级
18、动态范围:3 logs
19、结果具有高度重复性:CV≤10%
20、结果分析:实验结束后,无需人工分析,软件会自动给出蛋白分子量大小、信噪比、百分比和峰面积
21、结果呈现形式:化学发光成像结果,峰型图结果和泳道式结果
22、定量分析:运行结束后自动给出标准曲线,可**定量分析
23、软件升级:免费升级,可安装在任意电脑上,没有拷贝数限制
24、软件设置:客户可定义样品名称,设置检测流程,软件控制整个系统全自动运行,自动完成蛋白质样品上样、分离、固定、一抗孵育、二抗孵育,**化学发光检测和定量分析
目前,ProteinSimple公司提供四种Simple Western仪器。如何选择,请看下表。
关于PS公司
美国ProteinSimple公司 (简称 PS公司)是一家致力于定义未来蛋白质分析的生命科学公司,它结合了Alpha Innotech、Cell Biosciences、Protein Forest、Brightwell Technologies和Convergent Bioscience等行业**品牌,为生命科学、医学、制药和生物公司提供简单、**和高效的技术平台。
总部位于加州美国硅谷,在美国加州、加拿大多伦多、加拿大渥太华等地设有生产和研发部门,同时在全球多地设有办事处。PS公司重视中国市场的发展,在北京、上海,广州和武汉设有办事处和技术服务中心,为用户提供完善的技术支持和售后服务。