麦氏虫卵计数板(改良麦克马斯特虫卵计数板)
McMaster Egg Slide Counting Chamber
改良麦克马斯特计数板是由中国农业科学院兽医所监制生产 。
符合“动物球虫病诊断技术”国家标准GB/T 18647-2020 。
由两个10×10×1.5mm的计数室经激光蚀刻出方格线。
适用于可被饱和盐水漂浮的各种虫卵的计数。
产品网页:http://www.yiqibank.com/yiqibank_Product_22204949.html
技术参数:麦氏虫卵计数板
包装:一个/包,塑料盒,内附说明书。
计数室:一个玻璃板上蚀刻有两个计数室。
计数室尺寸:10×10×1.5mm,体积0.15cm3或0.15ml。
线格:经激光蚀刻出方格线。
技术标准:符合GB/T 18647-2020(动物球虫病诊断技术)
适用范围:可被饱和盐水漂浮的各种虫卵、卵囊。
操作步骤:
1、器材:便盒、烧杯、量筒、饱和食盐水、蒸馏水、吸管、玻棒、60目铜筛网或尼龙网、显微镜。
2、饱和食盐水:称取400克氯化钠放入三角烧瓶中,加入1000mL沸水,搅拌充分溶解后静置冷却,有少量盐析出,即为饱和盐水,比重约为1.18。
3、方法:
取粪便2克,放入烧杯中,先加水5ml,搅拌混匀后加饱和盐水至60ml,混匀后用铜筛网过滤,吸取粪液,注入麦克马斯特计数板的计数室内,静置5分钟后,在显微镜下计数两个刻度室中的虫卵(EPG)或卵囊(OPG)数。
4、结果计算(公式):
两个计数室的虫卵数的平均值A乘以200,即为每克粪便中的虫卵或卵囊数。
按照如下公式计算每克粪便中虫卵EPG或卵囊OPG数量:
EPG/OPG=(n1+n2)/2÷0.15×60÷2
=A×200
其中 (n1+n2)/2为平均每个计数室内卵囊数A
0.15为每个计数室有效体积为0.15mL
60为粪液总体积为60mL
2为所用粪便克数为2g。
实例:两个计数室分别18和20个,则结果等于(18+20)/2÷0.15×60÷2=19×200=3800
该份粪便虫卵数为3800个/克。
计算公式:http://www.yiqibank.com/yiqibank_Article_11723471.html
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其他相关资料——粪便虫卵检查法:
1、直接涂片法:
方法简便,但检出率不高。 为了提高阳性检出率,每个检样应多查几片。
2、漂浮集卵法:
应用比重比被检虫卵大的漂浮液,使蠕虫卵、球虫卵囊等浮于液体表面,易于集中检查。如用饱和盐水漂浮法检查粪便中的线虫卵和球虫卵囊。缺点是高比重的漂浮液易使虫卵和卵囊变形(高渗透压),检查时必须迅速。常用的漂浮液还有次亚硫酸钠饱和液、硫酸镁饱和液、硝酸钠饱和液、硝酸铅饱和液等。检查比重较大的虫卵,如棘头虫虫卵、猪肺丝虫虫卵及吸虫卵时,需用硫酸镁、硫代硫酸钠以及硫酸锌等饱和溶液。
3、沉淀集卵法:
可用自然沉淀法或离心沉淀法进行沉淀,首先是用水处理粪便,经离心或自然沉淀,使虫卵沉淀集中,易于检查。主要是检查吸虫卵,但对其它虫卵也可检查。还可适用于检查尿液内的虫卵。
4、麦氏计数法:
用麦克马斯特虫卵计数板来计数粪便中虫卵或球虫卵囊,是一种定量法。主要用来了解动物感染寄生虫的强度及判断驱虫效果等。常用的有麦克马斯特氏法(MacMaster’s method),也称为计数室计数法。麦氏计数板由两个10×10×1.5mm的计数室经激光蚀刻出方格线,每个计数室的容积为0.15毫升(0.15立方厘米)。计数时,取2克粪便,放入烧杯内,加入饱和盐水58毫升充分搅拌或震荡混合,通过粪筛过滤。将滤液边摇晃边用吸管吸取少量,加入计数室,放于显微镜载物台上,静置2-5分钟后,用低倍镜将两个计数室内见到的虫卵全部数完,取平均值乘以200,即为每克粪便中的虫卵数(EPG)。需指出的是该方法只适用于可被饱和盐水漂起的虫卵,不适合吸虫卵及其它比重大的虫卵的计数。
没有计数板时,也可以用漂浮法或沉淀法来进行虫卵计数。即称取一定量粪便(1~5克),加入适量(10倍量)的漂浮液或水后,进行过滤,而后或漂浮或进行反复水洗沉淀,然后用载片或盖片沾取表面漂浮液或吸取沉渣,进行镜检,计数虫卵。计数完一片后,再检查下一片、第三片……,直到不再发现虫卵或沉渣全部看完为止。然后将见到的虫卵总数除以粪便克数,即为每克粪便虫卵数。
5、毛蚴孵化法和幼虫培养法:
圆线虫目所属线虫种类很多,其虫卵在形态上非常相似,很难区别。有时为了区别这些线虫的种类,常将含有虫卵的粪便加以培养,待其中虫卵发育成为第三期幼虫时,再检查幼虫,根据幼虫形态上的差异,加以鉴别。也利用培养的第三期幼虫来进行人工感染试验。
毛蚴孵化法是诊断日本血吸虫及东毕吸虫的方法之一,其依据是血吸虫卵内的毛蚴在适宜的的条件下能很快孵出,并集中于水面下,利用这一特性进行检查确诊。
6、幼虫分离法:
又称为贝尔曼氏法(Baermann’s technique)。用于生前诊断一些肺线虫病(如网尾科线虫)和从粪便培养物中分离第三期幼虫,或从被剖检动物的某些组织中分离活的幼虫。操作方法:用一小段乳胶管两端分别连接漏斗和小试管,然后置漏斗架上,通过漏斗加40℃温水至漏斗中部,漏斗内放置上有被检材料(粪便或组织)的粪筛或纱布。静置1~3小时后,大部分幼虫游走沉于试管底部。此时拿下小试管,吸弃上清液,取管底沉淀物镜检。也可将分离装置放入温箱内过夜后检查。
7、测微技术:
各种虫卵和幼虫,常有恒定的大小,测量虫卵或幼虫的大小,可作为确定某一虫卵或幼虫的依据。虫卵和幼虫的测量需用测微器,现在也可以通过专门的照相设备和相应的软件直接测定显微镜下观察的幼虫和虫卵的大小。
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