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DNA损伤后的两条修复途径-多功能混匀仪技术文章
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DNA损伤后的两条修复途径-多功能混匀仪技术文章
一个细胞怎样检测到DNA的损伤并招募正确的细胞成分来对损伤进行修复呢?这个过程的细节仍然是个谜。Katsunori Sugimoto and colleagues在Science上报道发现在检测DNA损伤的过程中可能存在两个不同的机制。
当真核细胞遇到DNA损伤的情况时,它们会激活检查点的信号传导途径让细胞周期停下来并诱导基因的表达对DNA的损伤进行修复。这个检查点途径包括识别DNA损伤的蛋白和起始信号反应的蛋白。如果没有这个调控机制,基因组的不稳定性就可能会导致癌症。
在酿酒酵母中,两个必需的基因MEC1和RAD53组成了检查点途径的核心。在DNA损伤后,RAD53被磷酸化,被MEC1依赖的机制激活,RAD53的磷酸化也依赖于几个其他的基因RAD9,DDC1,MEC3,RAD17andRAD24。
为了检测这些基因的产物在修复机制中的作用,S在一个特异性的位点造成了DNA的损伤,进行检测检查点蛋白是否与这些区域相结合。这些损伤被连续的表达homothallic switching(HO)内切酶基因造成MAT(mating-type)位点特异性的双链DNA断裂。
研究者分析了在HO表达的细胞中由半乳糖诱导的GAL10启动子驱动表达的RAD53磷酸化情况,确定RAD53确实能被双链DNA的形成所诱导磷酸化,但在两者之间有一些迟延。
在突变体中RAD53磷酸化的状态分析发现依赖于RAD9,DDC1,MEC3,RAD17andRAD24。染色体**沉淀实验发现Ddc1蛋白在HO表达后与MAT邻近的区域相结合。
更多的突变体实验说明Ddc1的结合依赖与RAD24而非MEC1或RAD9。研究者接着发现MEC1在HO表达后也结合在切割位点的附近,但与Ddc1结合位点不同。
研究者因此认为MEC1和Ddc1在DNA双链损伤后的修复机制是互相独立的两条途径
转自生命科学论坛
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