线粒体染色试剂盒使用注意事项: M16染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化,确定zui佳条件。
线粒体染色试剂盒染色工作液配制:
根据样本数量,用染料稀释液将BBcellProbeTM M16荧光染料100倍稀释,再用相应的培养基或者HBSS缓冲液20-400倍稀释(对于后续需要做固定或透化的样本,20-100倍稀释),配制成染色工作液。
【注】:
也可以直接用相应的培养基或HBSS等缓冲液稀释M16染料母液至所需浓度。
建议收到产品后,根据单次使用量,对母液进行小量分装,每次使用一管,试剂-20℃避光冻存,一年稳定。
开始实验前,使用培养基或HBSS缓冲液稀释储存液到需要的工作浓度。工作浓度为根据不同细胞的预实验结果确定的zui佳工作浓度,一般染色终浓度2000-40000倍稀释。
为了降低过度加载染料导致的潜在背景和线粒体毒性,在不影响实验结果的前提下应尽可能低浓度染色。另外,浓度过高也可能造成非特异性染色,对其他细胞结构进行染色。
工作液现配现用。
为了降低探针加载过度可能引起的假阳性,建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。
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