钙检测对于许多生物学研究至关重要。荧光探针显示结合钙的光谱响应,使研究人员能够通过荧光显微镜,流式细胞仪,荧光光谱和荧光酶标仪研究细胞内游离钙浓度的变化。Rhod-2 AM*常用于红色荧光钙指示剂之一。然而,Rhod-2 AM在酯酶水解后仅在活细胞中发生中度荧光,并且具有非常小的细胞钙反应。
百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供的钙Cal-590™很好的改善了RHOD-2 AM细胞负载和钙反应,同时保持Rhod-2 AM的相似的光谱波长,使其与TRITC / Cy3®滤波器组集合。在CHO和HEK细胞中,Cal-590 TM的细胞钙反应比Rhod-2 AM敏感得多。Cal-590™的光谱与fitc、alexa fluor®488和gfp的光谱很好地分离,使其成为一种理想的钙离子探针,可与gfp细胞系或fitc/alexa fluor®488标记抗体复合进行细胞内分析。
图1. Cal-590™在氯化钙(5 mM)存在下的激发和发射光谱
图2. Cal-590™在含有0至39μM游离Ca 2+溶液中的荧光发射光谱
图3.在相同条件下用Cal-590 TM AM(红色曲线,Cat#20510)和Rhod-2,AM(蓝色曲线)孵育的CHO-K1细胞中内源性P2Y受体的ATP刺激的钙响应。将CHO-K1细胞在96孔黑壁/透明底板中以每100μL/孔50,000个细胞的细胞密度接种过夜。向细胞中加入100μL的5μg/ mL Cal-590 TM AM或具有2.5mM丙磺舒的Rhod-2AM,并将细胞在37℃下孵育1小时。ATP(50μL/孔)通过FlexStation®加入(Molecular Devices)中,以达到*终的指定浓度。
图 4.CHO-K1细胞中内源性P2Y受体对ATP的反应。在Costar 96孔黑壁/透明底板中以每孔100μL40,000个细胞接种CHO-K1细胞过夜。100微升的4μM的校准- 590™AM(货号:20510)在HHBS用1mM丙磺舒加入到孔中,并且将细胞在37℃下温育2小时。将染料上样培养基替换为100μLHHBS和1mM丙磺舒,然后在添加50μL300μMATP之前和之后使用TRITC通道用荧光显微镜(Olympus IX71)成像。
相关产品订购信息
货号
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产品名称
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规格
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价格
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20510
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Cal-590™AM
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5x50 ug
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2340
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20511
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Cal-590™AM
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10x50 ug
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3540
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20512
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Cal-590™AM
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1mg
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5940
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20518
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Cal-590™,钾盐
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5x50 ug
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2340
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20515
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Cal-590™,钠盐
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5x50 ug
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2340
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20519
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Cal-590™ 钾盐
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1mg
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5940
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20508
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Cal-590™-右旋糖酐缀合物 *MW 3,000*
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1mg
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3540
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20509
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Cal-590™-右旋糖酐缀合物 *MW 10,000*
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1mg
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3540
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