X-Rhod-1通常用作红色荧光钙指示剂。然而,X-Rhod-1在酯酶水解后仅在活细胞中发生中度荧光,并且具有非常小的细胞钙响应。此外,X-Rhod-1主要局限于于线粒体,因此信号/背景比低。
百萤生物为您推荐的上等钙离子探针Cal-630™极大的改善了X-Rhod-1细胞负载和钙响应,同时保持与X-Rhod-1的相似光谱波长,使其与TexasRed®过滤器组兼容。在CHO和HEK细胞中,Cal-630 TM的细胞钙响应比X-Rhod-1更敏感。Cal-630™的*大发射波长与FITC,AlexaFluor®488和GFP的*大发射波长完全分离,使其成为用于将细胞内测定与GFP细胞系或FITC /AlexaFluor®488标记的抗体多重化的理想钙探针。
图1. Cal-520(绿色),Cal-590(橙色)和Cal-630(红色)的标准化发射光谱
图2. Cal-630在0至39μM游离Ca 2+溶液中的荧光发射光谱
图3.用Cal-630 TM AM(货号:20530)测量的CHO-K1细胞中内源性P2Y受体的ATP刺激钙响应。将CHO-K1细胞在96孔黑壁/透明底板中以每100μL/孔50,000个细胞的细胞密度接种过夜。向细胞中加入100μL含有2.0mM丙磺舒的10μg/ mL Cal-630 TM AM,将细胞在37℃下培养2小时。ATP(50μL/孔)通过FlexStation®加入(Molecular Devices)中,以达到*终的指定浓度。
图 4.CHO-K1细胞中内源性P2Y受体对ATP的反应。在96孔黑壁/透明底板中以每孔100μL40,000个细胞接种CHO-K1细胞过夜。将含有1mM丙磺舒的HHBS中的100μL4μMCal -630 TM AM(Cat#20530)加入孔中,并将细胞在37℃下孵育2小时。将染料上样培养基替换为100μLHHBS和1mM丙磺舒,然后在添加50μL300μMATP前后,用TRITC通道用荧光显微镜(Olympus IX71)成像。
相关产品订购信息
货号
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产品名称
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规格
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价格
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20530
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Cal-630™AM
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5x50 ug
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3540
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20531
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Cal-630™AM
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10x50 ug
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4740
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20532
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Cal-630™AM
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1mg
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8340
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20535
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Cal-630™,钠盐
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5x50 ug
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2340
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20538
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Cal-630™,钾盐
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5x50 ug
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2340
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