AAT Bioquest 生产的小麦胚芽凝集素（WGA）能与N-乙酰葡萄糖胺和唾液酸结合，是目前研究较多且有用的凝集素之一。小麦胚芽凝集素可用于标记细胞膜（如：活细胞、固定细胞、组织切片、酵母、革兰氏阳性**及**等 ），从而进行荧光成像和分析。也可用于**荧光（IF）、**组织化学（IHC）和流式细胞术（FC）。
图1.HeLa 细胞用浓度为 10 µg/mL 的 mFluor™ Violet 450小麦胚芽凝集素 (WGA) 探针染色 30 分钟。使用配备紫罗兰滤光片组的荧光显微镜获取的图像。
mFluor Violet 450小麦胚芽凝集素(WGA)探针优势：
1.应用广泛；
2.不受膜电位控制；
3.用于细胞膜表面的标记，有助于膜结构的成像
mFluor Violet 450小麦胚芽凝集素(WGA)探针参数
Ex(nm)
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406
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Em(nm)
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445
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溶剂
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Water
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存储条件
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在-15℃以下保存，避光防潮
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mFluor Violet 450小麦胚芽凝集素(WGA)探针适用仪器
荧光显微镜
Ex
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406nm
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Em
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445nm
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推荐孔板
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黑色透明底板
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mFluor Violet 450小麦胚芽凝集素(WGA)探针实验方案
样品分析方案
溶液配制
储备溶液配制
mFluor 450 小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物储备液 (200X)
将 500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中，制成 2 mg/mL 的储备溶液。
注意：重新配制的缀合物溶液可在 2-8 °C 下短期储存，或在 -20 °C 下长期储存。
工作溶液配制
mFluor 450 小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物工作溶液 (1X)
将 5 μL 200X WGA 储备溶液添加到 1 mL HHBS 缓冲液中。
注意：不同细胞系的优化染色浓度可能不同。 活细胞的推荐起始浓度为 5-10 µg/mL。
操作方案
活细胞染色
1. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
2. 添加 100 µL mFluor 450-WGA 工作溶液。
3. 将细胞与 WGA 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分钟。
4. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
5. 使用 Ex/Em = 406/445 nm在荧光显微镜上成像细胞。
固定细胞染色
1. 用含4%甲醛的PBS溶液固定细胞。
注意：对于固定细胞膜染色，建议在没有透化步骤的情况下进行染色。固定后透化步骤会导致细胞内区室染色，如高尔基体和内质网 (ER) 结构染色。
2. 添加 100 µL mFluor 450-WGA 工作溶液。
3. 在室温下，用 WGA 工作溶液孵育细胞 10-30 分钟。
4. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
5. 使用Ex/Em = 406/445 nm在荧光显微镜上成像细胞。