与香豆素和花菁相比,罗丹明通常更耐光并且对PH值不敏感。被广泛使用的罗丹明胺包括罗丹明110、四甲基罗丹明(例如TAMRA或TRITC)和X-罗丹明(例如TexasRed)。罗丹明缀合物必须仔细制备,因为当多于两个或三个染料分子共价附于靶分子(例如抗体分子)时,它们特别容易淬灭。
常见罗丹明染料光谱性质
表一 四甲基罗丹明(TRITC)光谱性质
激发波长(nm)
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488/532nm激发
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滤波片组
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TRITC
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Ex(nm)
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552
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Em(nm)
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578
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消光系数
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85000
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荧光量子产率
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0.1
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图1.四甲基罗丹明(TEITC)的激发和发射光谱
罗丹明反应性染料
反应性荧光罗丹明和罗丹明衍生物广泛用于共价标记生物分子,例如抗体、碳水化合物、核酸、蛋白质、肽和寡核苷酸。罗丹明共轭物可产生明亮且稳定的橙色荧光,常与蓝色、绿色或远红外色荧光探针组合使用,用作检测酶活性或在多重荧光研究中提供对比的底物。特定的罗丹明和罗丹明衍生物很容易与染料的各种基团进行反应。
表二 可用于标记生物分子的反应性罗丹明和罗丹明衍生物
品名
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货号
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规格
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化学反应性
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反应基团
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5-羧基罗丹明110
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322
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5mg
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碳二亚胺预活化后的胺
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羧基
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6-羧基罗丹明110
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323
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5mg
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碳二亚胺预活化后的胺
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羧基
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5(6)-羧基四甲基罗丹明乙二胺
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354
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25mg
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醛、羧酸、酮
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乙二胺
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5-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯
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373
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5mg
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胺
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琥珀酰亚胺酯
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6-ROX 6-羧基-X-罗丹明
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382
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25mg
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胺
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琥珀酰亚胺酯
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Texas Red-X,琥珀酰亚胺酯
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474
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5mg
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胺
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琥珀酰亚胺酯
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表三 罗丹明标记的荧光缀合物
品名
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货号
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规格
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生物功能
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Ex/Em(nm)
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鬼笔环肽-罗丹明标记
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23102
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300Tests
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标记肌动蛋白微丝
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552/578
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AnnexinV TRITC标记
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20031
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100Tests
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检测细胞表面的磷脂酰丝氨酸(ps)
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544/570
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TRITC-葡聚糖偶联物
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21706
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25mg
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心血管,微循环,灌注,细胞膜通量示踪剂
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544/570
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TexasRed-链霉亲和素偶联物
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16911
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1mg
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心血管,微循环,灌注,细胞膜通量示踪剂
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586/603
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TexasRed山羊抗小鼠lgG(H+L)
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16853
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1mg
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间接检测小鼠一抗
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586/603
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表四 其他罗丹明指示剂
品名
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货号
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规格
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生物功能
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Ex/Em(nm)
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罗丹明123
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22210
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25mg
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活细胞线粒体指示剂
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508/528
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二氢罗丹明123
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15206
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10mg
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过氧化氢指示剂
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508/528
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罗丹明B
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22211
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10mg
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活细胞线粒体指示剂
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546/568
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四甲基罗丹明甲酯TMRM
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22221
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25mg
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线粒体膜电位指示剂
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552/574
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TRITC-DHPE
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23301
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1mg
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磷脂示踪剂
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544/570
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