44.培养基中添加了血清和***后,可长期保存吗? 一旦您在新鲜培养基中添加了血清和***时,您应该在两到三周内使用它。因为一些***和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。 45.培养基及其它添加物和试剂可反复冻融吗? 大部分添加物和试剂*多可以冻融3次,如果次数更多都会在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀,将会影响它的性能。 46.为什么要在溶解的一周内使用贮存在4℃冰箱中的液体胰蛋白酶溶液? 胰蛋白酶在4℃就可能开始降解,如果在室温下放置超过30分钟,就会变得不稳定。 47.保存血清*好的方法? 我们建议血清应保存在-5℃至-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的**容器内,再放回冷冻。 48.如何解冻血清才不会使产品质量受损? 将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。 49.血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理? 血清中沉淀物的出现有许多种原因,但*普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。 若欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400 g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。*好不使用过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。 50.为什么要热灭**清? 加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活**细胞和巨噬细胞。在**学研究,培养ES细胞、平滑肌细胞时,推荐使用热灭**清。 51.有必要做热灭活吗? 实验显示,经过正确处理的热灭**清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。 若非必须,可以不需要做热处理这一步。不但节省时间,更确保血清的质量! 52.为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀? 有些胎牛血清产品没有预老化,储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。推荐在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。
细胞培养技术是整个分子生物学实验的**步,关系到接下来整个实验的成功与否。以上,总结一下在细胞培养过程中可能遇到的疑惑和问题,希望能够为广大客户带来一点点的指引。本公司由海外华侨和多名海归博士组成的技术团队,主要致力于**学、分子生物学、病理学、代谢组学、生物化学技术在科研中的应用与推广,专业从事医学科研课题外包,项目申请、组织实施、检查评估、验收鉴定等服务。有着十分丰富的科研经验和实战技术,所以值得选择,以上信息仅供参考,详情请致电相关工作人员为您解答。
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