可能的原因
建议
目的蛋白有多个修饰位点(磷酸化位点、糖基化位点、乙酰化位点等),本身可以呈现多条带
查阅文献或进行生物信息学分析,获得蛋白序列的修饰位点信,通过去修饰确定蛋白实际大小
目的蛋白有其它剪切本
查阅文献或生物信息学分析可能性
样本处理过程中目的蛋白发生降解
加入蛋白酶抑制剂;样本处理时在冰上操作
上样量过高,太敏感
适当减少上样量
一抗不纯
纯化抗体
一抗或者二抗浓度偏高
降低抗体浓度
一抗特异性不高
重新选择或制备高特异性的抗体
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