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流式细胞术|实验技术服务
日期:2024-12-23 18:57
浏览次数:323
摘要:关键词:流式细胞术|实验技术服务
简介:世界****流式细胞术|实验技术服务原装**,质量保证,价格优惠。
流式细胞术|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。
我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧,承诺客户不成功不收费。我们所有的实验数据真实可信,我们提供原始的表达菌株和克隆质粒,客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。
产品品牌:流式细胞术|实验技术服务 http://www.shijichina.com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
测序实验流程:
PI 染色操作步骤
1、将单细...
关键词:流式细胞术|实验技术服务
简介:世界****流式细胞术|实验技术服务原装**,质量保证,价格优惠。
流式细胞术|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。
我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧,承诺客户不成功不收费。我们所有的实验数据真实可信,我们提供原始的表达菌株和克隆质粒,客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。
产品品牌:流式细胞术|实验技术服务 http://www.shijichina.com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
测序实验流程:
PI 染色操作步骤
1、将单细胞悬液加入2ml圆底离心管中,离心,1500rpm , 5min,弃上清液。
2、加入PBS 1ml离心洗涤1次,弃上清。
3、加入2ml预冷的70%酒精,4℃固定30min,或是-20℃固定。
4、离心,弃上清液。
5、用1×PBS 1ml洗涤1次,离心。
6、加入RNase A (工作浓度20ug/ml)于500ul 1×PBS中,37℃孵育30min,离心。
7、用1×PBS 1ml洗涤1次,离心。
8、加入PI(工作浓度50ug/ml) 于500ul 1×PBS中,室温避光孵育30min。
9、混匀,过300目筛网,置流式管中, 4℃冰箱保存,待测。
GFP PI染色操作步骤
1、将单细胞悬液加入2ml圆底离心管中,离心,1500rpm , 5min,弃上清液。
2、加入PBS 1ml离心洗涤1次,弃上清。
3、加入2ml预冷PFA,PFA的浓度根据细胞的特点进行调节,4℃固定30min。
以下步骤同PI 染色操作步骤的
细胞表面直接免疫荧光染色操作步骤
1、将单细胞悬液加入2ml圆底离心管中,离心,1500rpm,5min,弃上清液。
2、以冷PBA 1ml,离心洗涤,弃上清液。
3、加入用PBA稀释的荧光素标记的抗体200ul。用微量移液器轻轻吹打混匀,4℃或置冰上孵育30min-1h。
4、离心弃上清液。
5、加入冷PBS1ml,离心洗涤2次,以除去未结合的多余抗体成分。
6、向细胞中加入冷PBS 500ul,吹打混匀,置流式管中,4℃避光保存,待测。
细胞表面间接免疫荧光染色操作步骤
1-2、同细胞表面直接免疫荧光染色操作步骤
3、 用PBA稀释的**抗体200ul,对照管加入对应于一抗的正常实验动物IgG,轻轻吹打混匀,4℃或置冰上孵育1.5-2h。离心,弃上清。
4、 BS1ml离心洗涤1次,以去除多余的未结合的特异性抗体。
5、 PBA适当稀释的荧光素标记的**抗体200ul。吹打混匀,4℃或置冰上孵育30min,避光。
6、 PBS 1ml离心洗涤2次。
7、将细胞重新悬浮于500ulPBS中,混匀,置流式管中,避光,4℃冰箱保存,待测。
简介:世界****流式细胞术|实验技术服务原装**,质量保证,价格优惠。
流式细胞术|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。
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测序实验流程:
PI 染色操作步骤
1、将单细胞悬液加入2ml圆底离心管中,离心,1500rpm , 5min,弃上清液。
2、加入PBS 1ml离心洗涤1次,弃上清。
3、加入2ml预冷的70%酒精,4℃固定30min,或是-20℃固定。
4、离心,弃上清液。
5、用1×PBS 1ml洗涤1次,离心。
6、加入RNase A (工作浓度20ug/ml)于500ul 1×PBS中,37℃孵育30min,离心。
7、用1×PBS 1ml洗涤1次,离心。
8、加入PI(工作浓度50ug/ml) 于500ul 1×PBS中,室温避光孵育30min。
9、混匀,过300目筛网,置流式管中, 4℃冰箱保存,待测。
GFP PI染色操作步骤
1、将单细胞悬液加入2ml圆底离心管中,离心,1500rpm , 5min,弃上清液。
2、加入PBS 1ml离心洗涤1次,弃上清。
3、加入2ml预冷PFA,PFA的浓度根据细胞的特点进行调节,4℃固定30min。
以下步骤同PI 染色操作步骤的
细胞表面直接免疫荧光染色操作步骤
1、将单细胞悬液加入2ml圆底离心管中,离心,1500rpm,5min,弃上清液。
2、以冷PBA 1ml,离心洗涤,弃上清液。
3、加入用PBA稀释的荧光素标记的抗体200ul。用微量移液器轻轻吹打混匀,4℃或置冰上孵育30min-1h。
4、离心弃上清液。
5、加入冷PBS1ml,离心洗涤2次,以除去未结合的多余抗体成分。
6、向细胞中加入冷PBS 500ul,吹打混匀,置流式管中,4℃避光保存,待测。
细胞表面间接免疫荧光染色操作步骤
1-2、同细胞表面直接免疫荧光染色操作步骤
3、 用PBA稀释的**抗体200ul,对照管加入对应于一抗的正常实验动物IgG,轻轻吹打混匀,4℃或置冰上孵育1.5-2h。离心,弃上清。
4、 BS1ml离心洗涤1次,以去除多余的未结合的特异性抗体。
5、 PBA适当稀释的荧光素标记的**抗体200ul。吹打混匀,4℃或置冰上孵育30min,避光。
6、 PBS 1ml离心洗涤2次。
7、将细胞重新悬浮于500ulPBS中,混匀,置流式管中,避光,4℃冰箱保存,待测。