使用全自动凯氏定氮仪测定蛋白质的含量实验方法
使用全自动凯氏定氮仪测定蛋白质的含量实验方法
全自动凯氏定氮仪主要用于粮油检测、饲料分析、土肥检测等领域中的谷物、食品、饲料中氮含量的检测分析,它的性能正常与否直接影响检测结果的准确性。面对各类不同型号的全自动凯氏定氮仪,国家至今还没有针对该类仪器的校准规范。开展对全自动凯氏定氮仪校准方法的研究,以达到正确评价其计量性能的技术要求,保证测量数据的可比性、量值溯源与传递的*性,为今后规程的制定提供参考。此外分析了仪器使用中碰到的故障问题,对更好的进行仪器校准及维护,提高检测的准确度、提升检测能力和水平都有一定的帮助。
目前,蛋白质测定*常用的方法是凯氏定氮法,其通过测定总有机氮含量来确定蛋白质含量,可用于各类农作物和食品中蛋白质含量测定,国内外应用较为普遍,至今仍被作为标准检验方法。为了提高工作效率和准确度,将凯氏定氮装置换成消化炉和全自动凯氏定氮仪代替人工操作,可一次性消化20个样品管,仪器自动连续完成加水稀释、加碱、加酸、蒸馏、滴定、消化管排空和结果计算,快速、准确。因此,全自动凯氏定氮仪在农业、食品、化工、医药卫生等领域的粗蛋白质含量测定方面有着巨大的优势和应用前景。
为保证检测结果的准确性、可靠性和重现性,在实验室条件允许的情况下,使用全自动凯氏定氮仪测定蛋白质含量,可减少蒸馏、滴定等过程中人为因素造成的误差,操作过程中被测样品应是均匀的,当样品放入消化管时,不要黏附在管壁上以免出现碳粒,万一黏附可在加酸时缓慢冲下,以免被检样品消化不完全,使结果偏低。样品消化液必须含有过量的硫酸,以防止氨的损失。消化时间要掌握好,一般为60~90min,时间过长会引起氨的损失;消化时间不够或消化不完全会导致总氮量偏低。一定要将消化管放入通风橱中,并注意控制消化温度,刚开始消化时应用小火加热,后调至420℃使消化管内的反应物先碳化变黑再沸腾。