上海希言科学仪器有限公司
扫一扫,手机逛起来
主营: 上海希言科学仪器有限公司,主要的代理经营品牌有:巴罗克Biologix、海狸Beaver、诗董SRITRANG施睿康手套、沪析HUXI、EDO一斗,virya、MUCU、珀金埃尔默perkinelmer、赛默飞世尔-戴安Dionex、Duran蓝盖瓶、沃特世Waters、安捷伦Agilent、 Cytiva(通用GE)等知名品牌。
13234988670
您现在的位置:
首页 > 技术文章
技术文章

**靶点开发与验证浅谈

发布时间:2018-06-13

 相对于未知的**靶点来说,已知的**靶点只不过是冰山一角。如何能在众多的未知里发现并找到有效的**靶点?靶点的选择在整个**研发过程中起着至关重要的作用。现代**研究中,新靶点的建立往往是新药**的前提和保障。随着现代分子生物学技术的发展和人类基因组计划的完成,出现了大量可供**干预的新型分子靶点,但并不是所有的靶点都能够成为与**有关的有效靶点,因此对新型靶点进行开发和验证便成为非常重要的工作。
       据统计,除抗感染、抗病毒和抗寄生虫类**以外,制药工业用来作为**靶向筛选的靶标已有417种,包括受体、酶、离子通道等,**靶标大体涉及10个系统的功能和疾患:外周及**神经系统、***、炎症反应、血液及造血、癌瘤、心肾系统、胃肠系统、**调节、维生素缺乏、泌尿系统。到目前为止,已经有数千个靶点类蛋白被克隆纯化,包括大约包括大约750个G-蛋白偶联受体(GPCRs)、100多个配体门控性离子通道、60多个核受体、50多个细胞因子和大约20个具有重吸收和转运功能的蛋白质。多种靶点识别方法得到的**作用靶点只能作为靶点初步筛选的方法,之后需要对候选靶点进行验证。**靶点的开发和验证需要许多生物技术作支撑:
      基因水平的技术
           高通量基因表达技术
           cDNA过表达技术
           基因敲除(Konck-out)技术   
      蛋白质水平技术

           酵母双杂交系统
           蛋白质组学     
       基因水平技术靶点验证示例:**步就是确认此靶点在细胞实验中是否调节化合物的生物活性。可以通过RNA干扰技术沉默某一**的基因,形成缺乏特定靶标的小鼠,将**注射到基因敲除的小鼠中,若**没有引起效应,说明**是通过这一特定靶点作用的。除了RNA干扰技术,也可以用cDNA过表达来建立**-靶点作用关系,靶点的过表达可能会抑制**的活性。这种方法对于验证膜靶点极为重要,一旦假定的靶点通过功能实验的验证,就需要对小分子物质及靶点的亲和力进行量化。如果假定的靶点是一种酶,则要通过酶动力学实验检测此物质的酶活力。*后还需要通过NMR等进行更严格的验证,进而得到**-靶点复合物的三维结构。这些信息不仅可以验证物理上的关联性,也可以提供后期**优化中结合模型的鉴定标准。
       盛世华康核心业务之一,就是致力于利用先进的技术方法帮助**研发企业识别和验证已知或全新的**靶点。使客户能够对某个项目尽快做出评价和决策,从而有效的降低客户在**研发项目上投入的资金和人力风险。涵盖靶点筛选,新靶点细胞系的选择,靶点的验证及功能学实验。
     新靶点细胞系的选择
          通过qPCR和WB分别从mRNA水平和蛋白水平来考察不同待选细胞之间的差异。根据客户的需要找到合适的细胞系开展实验。
     **靶点筛选
          建立了**靶点筛选平台,通过shRNA或sgRNA文库的筛选,帮助客户找到与潜在的多样的**新靶点。并通过下游的靶点验证进一步明确靶点的功能。
     **靶点验证
          1.siRNA或者siRNA复合物介导靶基因的沉默     
              通过qPCR或WB技术分别验证mRNA或蛋白水平的基因沉默;
              通过细胞活力实验或软琼脂克隆形成实验分别检测靶基因沉默对肿瘤细胞2D和3D生长水平的抑制作用;
          2.shRNA介导的基因沉默      
              通过qPCR或WB技术分别验证shRNA稳转细胞株靶基因沉默效果;
              细胞凋亡检测;
              研究信号通路和生物标志物检测;
              通过细胞活力实验或软琼脂克隆形成实验分别检测靶基因沉默对肿瘤细胞2D和3D生长水平的抑制作用;

关于我们| 易展动态| 易展荣誉| 易展服务| 易家文化| 英才集结号| 社会责任| 联系我们

备案号:粤ICP备11010883号| 公安机关备案号:44040202000312| 版权问题及信息删除: 0756-2183610  QQ: 服务QQ

Copyright?2004-2017  珠海市金信桥网络科技有限公司 版权所有

行业网站百强奖牌 搜索营销*有价值奖 中小企业电子商务**服务商
以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,易展仪表展览网对此不承担任何保证责任。

沪公网安备 31011702004544号