摘要:目的 建立反相高效液相色谱法测定大血藤中大黄素含量的方法。方法 选用DiamonsilTMC18色谱柱(200 mm ×416 mm ,5μm) ;流动相:甲醇- 011 %磷酸水溶液(80∶20) ;检测波长:254 nm;流速:1100 mL/ min ;柱温:35 ℃。结果 大黄素进样量在010416~012080μg 范围内线性关系良好,r = 019997 ,平均加样回收率为10114 % ,10 批大血藤饮片中大黄素的含量范围为6172~13171μg/g。结论 该方法操作简便,快速,准确,重现性好。
关键词:大血藤;大黄素;反相高效液相色谱法
大血藤为木通科植物大血藤Sargentodoxacuneata (Oliv1) Rehd1et wils的干燥藤茎。别名红藤、血藤、大**等,具有****、****等功能,用于肠痈**,经闭痛经,风湿痹痛,跌扑肿痛。但是在某些地方,人们常拿鸡血藤伪品作大血藤用,为了保证临床用药**,所以很有必要控制它的质量。据文献[1,2]报道,大血藤中含有大黄素、大黄酚等蒽醌类成分,本文研究建立了大黄素的反相高效液相色谱含量测定法,为大血藤饮片质量控制提供依据。
1 仪器与试药
111 仪器
Agilent 1100 高效液相色谱仪,包括: G1311A 四元泵、G1322A 在线脱气机、G1316A柱温箱、G1314AVWD 检测器、Agilent Chem 工作站、电子天平(ER2182A ,Tokyo Japan) 。
112 试药
6 个产地的10批大血藤饮片,分别购自湖南、浙江、湖北、江西、江苏、河南,经北京中医药大学中药学院生药系阎玉凝教授鉴定为大血藤Sargento2doxacuneata (Oliv1) Rehd1et wils ;甲醇、磷酸(均为分析纯) 、纯净水;对照品大黄素( Emodin):购自中国药品生物制品检定所,批号为0756 - 9908。
2 方法与结果
211 对照品溶液的制备
精密称取大黄素对照品5120 mg ,置50 mL 容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,精密吸取大黄素对照品1 mL 置5 mL容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,制成每1 mL 含2018μg 的大黄素对照品溶液。
212 供试品溶液制备方法的考察
曾经考察过索氏提取3 h (提取已经完全) 与超声30 min 2 种方法,结果无显著差异。进一步又考察了超声15 、30 、45min 3 个时间段大黄素的含量,经测定超声30 min 已经提取完全,45 min 与30 min无显著差异,故采用超声30 min的提取方法。
213 供试品溶液的制备
取河南产大血藤饮片粉末(过60 目筛) 约6 g ,精密称定,精密加入甲醇50 mL ,称定重量,超声30min,放冷,补足重量,滤过,精密吸取续滤液25 mL蒸干,残渣用甲醇溶解并转移至2 mL 容量瓶中,用甲醇定容,摇匀,用0145μm微孔滤膜滤过,即得。
214 检测波长的选择
吸取大黄素对照品溶液适量,以甲醇为空白,在200~600 nm 扫描,测定其紫外吸收光谱。λmax = 254nm ,因此选定254nm 作为检测波长。
215 色谱条件
DiamonsilTMC18色谱柱(200mm ×416 mm ,5μm) ;流动相:甲醇- 011 %磷酸水溶液(80∶20);检测波长:254 nm;流速:1100 mL/ min ;柱温:35 ℃。
2. 6 方法的专属性
在拟定的色谱条件下,分别取对照品溶液和供试品溶液进样测定,得到特征峰,与其他峰基本分离,结果见图1。
本篇文章来源于 反相高效液相色谱法测定大血藤中大黄素的含量|科学仪器在线 原文链接:http://www.hg17.com/knowledgeview483.html