中国仓鼠卵巢细胞；CHO

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形态特性：上皮样

生长特性：贴壁生长

特征特性：1957年，PuckTT从成年中国仓鼠卵巢的活检组织建立了CHO细胞；广泛用于生物制品的表达。

培养条件：DMEM(高糖）+10%FBS

传代方法:1:3传代，CQ-4天换液一次
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台； 

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 

4--2-氟 98%HSV II -Ab(Human Herpes simplexvirus II antibody) ELISA Kit  人单纯疱疹病Ⅱ型抗体兔促胰液素(SCT)酶联吸附测定试剂盒

4--3-氟 98%Human Estrogen-induced protein pS2 ELISA Kit  人雌诱导蛋白PS2兔紧密结合蛋白1(TJP1)酶联吸附测定试剂盒

5--2-氟 97%BV(Human bacterial vaginosis) ELISA Kit  人细性病兔迟现抗原(VLA)酶联吸附测定试剂盒

2--4-氟 99%HSV I Ab(Human Herpes simplexvirus I antibody) ELISA Kit  人单纯疱疹病Ⅰ型抗体兔白介素1受体拮抗剂(IL-1ra)酶联吸附测定试剂盒

2--6-氟 98%Human Estrogen-induced protein pS2 ELISA Kit  人雌诱导蛋白PS2兔尿嘧啶核苷化酶2(UPP2)酶联吸附测定试剂盒

4--2-氟 99%HPV-IgM(Human papillomavirus IgM) ELISA Kit  人状瘤病抗体IgM兔叉头框蛋白C1(FOXC1)酶联吸附测定试剂盒

5--2-氟 98%HPV-IgG(Human papillomavirus IgG) ELISA Kit  人状瘤病抗体IgG兔胆固酯转移蛋白(CETP)酶联吸附测定试剂盒

3,5-二-2-氟吡啶 98%HSV-Ag2(Human Herpes simplex virus 2) ELISA Kit  人单纯疱疹病抗原2兔周期素D1(CCND1)酶联吸附测定试剂盒

2,4-二-5-硝三氟 98%fPSA(Human Free Prostate Specific Antigen) ELISA Kit  人游离前列腺特异性抗原兔黏膜地址素黏附分子(MAdCAM1)酶联吸附测定试剂盒

2,3-二氟 98%PSA(Human prostate specific antigen) ELISA Kit  人前列腺特异性抗原兔脂肪合酶(FASN)酶联吸附测定试剂盒

2,5-二氟 98%PS(Human phosphatidylserine) ELISA Kit  人脂酰丝氨兔胃泌素抑制肽(GIP)酶联吸附测定试剂盒  

3,4-二氟 98%PC/CPG(Human choline phosphoglyceride) ELISA Kit  人胆碱甘油酯兔蛋白激酶Bγ(PKBG)酶联吸附测定试剂盒

3,4-二氟-2- 97% TBA(Human Total bile acide) ELISA Kit  人总胆汁兔组织多肽抗原(TPA)酶联吸附测定试剂盒

4,5-二氟-2- 98% Apo C3(Human Apolipoprotein C3) ELISA Kit  人载脂蛋白C3兔皮肤反应因子/炎性因子(SRF/IF)酶联吸附测定试剂盒

2,3-二氟苄溴 98%CH(Human cholesterol) ELISA Kit  人血清总胆固兔L1粘附分子(L1CAM/CD171)酶联吸附测定试剂盒
中国仓鼠卵巢细胞；CHO性鞘脂酶Elisa试剂盒Alexa Fluor 350标记的羊抗小鼠IgMPCDHGC5  原钙粘蛋白γC5抗体

β-葡萄糖脑苷脂酶Elisa试剂盒Cy3标记的羊抗小鼠IgMPCDHGC4  原钙粘蛋白γC4抗体

β氨己糖苷酶AElisa试剂盒Cy5标记的羊抗小鼠IgMPCDHGC3/PCDH2  原钙粘蛋白γC3抗体

异质性胞核核糖核蛋白KElisa试剂盒Cy5.5标记的羊抗小鼠IgMPCDHGB6  原钙粘蛋白γB6抗体

硫软骨素Elisa试剂盒Cy7标记的羊抗小鼠IgMPCDHGB5  原钙粘蛋白γB5抗体

阿立新BElisa试剂盒Alexa Fluor 647标记的羊抗小鼠IgMPCDHGB4  原钙粘蛋白γB4抗体

晶状体蛋白αAElisa试剂盒胶体金标记的羊抗小鼠IgMPCDHGB2  原钙粘蛋白γB2抗体

CHO宿主蛋白Elisa试剂盒碱性酶（AP）标记的羊抗大鼠IgGPCDHGB1  原钙粘蛋白γB1抗体

鹦鹉衣原体抗体Elisa试剂盒胶体金标记的羊抗大鼠IgGPCDHGA9  原钙粘蛋白γA9抗体

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