形态特性:上皮样
生长特性:贴壁生长
特征特性:HCT116是1979年M.Brattain等从患结肠癌的男性病人中分离的三株恶性细胞之一。在半固体琼脂糖培养基中形成克隆。HCT116在无胸腺的裸鼠有致瘤性,形成上皮样的肿瘤
培养条件:McCOY's5A+10%FBS
传代方法:1:3传代,CQ-4天换液一次
产品名称
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规格
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货号
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结肠癌细胞;HCT-116
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T25
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FS-X3231
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冻存培养基:
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案:
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
实验材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个;
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个,细胞培养瓶1个
5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块;
7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;
8、酒精灯1台;
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
广泛PH试纸(pH1-14) 1-14,显色反应间隔1GSTs(Human glutathione S-transferases) ELISA Kit 人谷胱甘肽S转移酶兔15脂加氧酶(15-LO)酶联吸附测定试剂盒
广泛PH试纸(pH1-4) 1-4,显色反应间隔0.5 80条/盒DUB(Human deubiquitinating enzyme) ELISA Kit 人泛素分解酶兔肌球蛋白轻链1(MYL1)酶联吸附测定试剂盒
广泛PH试纸(pH1-10) 1-10,显色反应间隔0.5 80条/盒sPLA2(Human secreted phospholipase A2) ELISA Kit 人型脂酶A2兔间隙连接蛋白26(CX26)酶联吸附测定试剂盒
广泛PH试纸(pH1-12) 1-12,显色反应间隔1
80条/盒E3/UBPL(Human E3/ubiquitin-protein ligase) ELISA Kit 人泛素连接酶兔水通道蛋白3(AQP-3)酶联吸附测定试剂盒
广泛PH试纸(pH4-10) 4-10,显色反应间隔1 80条/盒MCT(Human mast cell tryptase) ELISA Kit 人肥大类胰蛋白酶兔血管性血友病因子(VWF)酶联吸附测定试剂盒
广泛PH试纸(pH9-14) 9-14 80条/盒DT(Human dopachrome tautomerase) ELISA Kit 人多巴色素异构酶兔胎盘核糖核抑制剂(PRI)酶联吸附测定试剂盒
醋铅试纸 80条/盒,10盒/箱E2/UBCE(Human E2/ubiquitin-conjugating enzyme) ELISA Kit 人泛素结合酶兔白分化抗原CD109(CD109)酶联吸附测定试剂盒
醋铅试纸 100条/盒PDI(Human protein disulfide isomerase) ELISA Kit 人蛋白质二硫键异构酶兔粘蛋白5B(MUC5B)酶联吸附测定试剂盒
蓝石蕊试纸 pH值变色范围:8.0(蓝色)~4.5(红色)CAD(Human caspase activated deoxyribonuclease0 ELISA Kit 人胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酶兔补体C3转化酶(C3c)酶联吸附测定试剂盒
红石蕊试纸 pH值变色范围:4.5(红色)~8.0(蓝色)Gamma-ECS(Human Gamma-glutamyl systeine synthetase) ELISA Kit 人γ谷氨酰半胱氨合成酶兔原钙黏素1(PCDH1)酶联吸附测定试剂盒
橙试纸 SZE1/UBAE(Human E1/ubiquitin-activating enzyme) ELISA Kit 人泛素激活酶兔GATA结合蛋白2(GATA2)酶联吸附测定试剂盒
中性石蕊试纸 PH范围8.0-5.0PP(Human Pepsin) ELISA Kit 人胃蛋白酶兔白介素2受体β(IL-2Rβ)酶联吸附测定试剂盒
酚酞试纸 pH变色范围:8.2(无色)~10.0(红色)HK(Human Hexokinase) ELISA Kit 人己糖激酶兔肌腱蛋白C(TNC)酶联吸附测定试剂盒
淀粉-化试纸 SZPDH E1(Human pyruvate dehydrogenase-E1) ELISA Kit 人酮脱氢酶E1兔多巴受体D5(D5R/DRD5)酶联吸附测定试剂盒
汞试纸 0-10ppmGSK(Human glycogen synthase kinase) ELISA Kit 人糖原合成酶激酶兔跨膜丝氨蛋白酶2(TMPRSS2)酶联吸附测定试剂盒
结肠癌细胞;HCT-116血浆蛋白酶C1抑制剂Elisa试剂盒PE-Cy3标记的小鼠抗大鼠IgGOXCT1 含氧辅酶A转移酶1抗体
脯氨肽酶Elisa试剂盒PE-CY5标记的小鼠抗大鼠IgGOVCA2 卵巢癌相关因2蛋白抗体
环氧化酶Elisa试剂盒APC标记的小鼠抗大鼠IgGOVCA1 卵巢癌相关因1抗体
脂蛋白脂肪酶Elisa试剂盒Alexa Fluor 350标记的小鼠抗大鼠IgGOVA/SerpinB8 鸡卵白蛋白/卵清蛋白抗体
环氧化合物水解酶1Elisa试剂盒Alexa Fluor 488标记的小鼠抗大鼠IgGOTUB1 泛素特异性蛋白酶OTB1抗体
球蛋白M4Elisa试剂盒Alexa Fluor 555标记的小鼠抗大鼠IgGOTUB 泛素特异性蛋白酶Otubain2抗体
超敏心肌肌钙蛋白Elisa试剂盒Alexa Fluor 647标记的小鼠抗大鼠IgGOtoraplin/OTOR/Fibrocyte derived protein 纤维源性蛋白
克里米亚刚果出血热抗原Elisa试剂盒PE-Cy5.5标记的小鼠抗大鼠IgGOTOA/DFNB22 耳聋、常染色体隐性遗传22抗体
下调膜联蛋白 A2Elisa试剂盒生物素标记的小鼠抗大鼠IgGOTC 鸟氨氨酰转移酶抗体
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