实验材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个，细胞培养瓶1个
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块；
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；
8、酒精灯1台；
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产品名称
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规格
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货号
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结肠癌氟尿嘧啶耐药株
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T25
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FS-X3235
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形态特性：上皮样
生长特性：贴壁生长
培养条件：RPMI-1640
传代方法:1：2传代
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冻存培养基：
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地��细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
硒粉 ≥99.999% metals basis，-100mesh，powderFlt3(Human FMS-like tyrosine kinase 3) ELISA Kit 人FMS样酪氨激酶3兔白介素2(IL-2)酶联吸附测定试剂盒
硒 ≥99.9999% metals basis,PowderFlt-3L(Human FMS-like tyrosine kinase 3 ligand) ELISA Kit 人FMS样酪氨激酶3配体兔甘露糖凝集素受体(MBLR)酶联吸附测定试剂盒
水质硒标样 浓度范围:4.95-20.2(mg/L)，分析标准品ACE(Human Angiotensin converting enzyme) ELISA Kit 人血管紧张素转化酶兔周期素依赖性激酶1(CDK1)酶联吸附测定试剂盒
硒 99.999% metals basis，1-6MM particle size AMBP(Human alpha-1-microglobulin/bikunin precursor) ELISA Kit 人α1微球蛋白/bikunin前体兔TU3A蛋白(TU3A)酶联吸附测定试剂盒
硒 ≥99.9999% metals basis,Powder,不规则颗粒Human podocin ELISA Kit 人Podocin兔半胱氨酰白三烯受体1(CYSLTR1)酶联吸附测定试剂盒
四 Standard for GC，>99.9(GC)Human Nephrin ELISA Kit 人蛋白兔促性腺释放(GnRH)酶联吸附测定试剂盒
四 光谱级, ≥99.5%Alpha1-MG(Human Alpha1-microglobulin) ELISA Kit 人α1微球蛋白兔催素(PRL)酶联吸附测定试剂盒
四(THF) 无水级,≥99.9%, 无稳定剂ALB(Human microalbunminuria) ELISA Kit 人尿微量白蛋白兔补体成分5a(C5a)酶联吸附测定试剂盒
四 AR,99.0%AAA(Human Anti-adrenocortical antibody) ELISA Kit 人抗肾上腺皮质抗体兔趋化因子(Lptn/XCL1)酶联吸附测定试剂盒
四 ≥99.5% (GC)RANA(Human rheumatoid arthritis associated nuclear artigen) ELISA Kit 人抗类风湿关节炎核抗原兔Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)酶联吸附测定试剂盒
四 for HPLC, ≥99.9%THP(Human T-H glycoprotein) ELISA Kit 人TH糖蛋白兔视黄诱导因/RIG-1样受体(RLR)酶联吸附测定试剂盒
四 ACS，>99.5% (GC) GTE-AGE(Human Glomerular tissue extract-advanced glycosylation end products) ELISA Kit 人肾小球组织糖化终末产物兔卷曲同源物8(FZD8)酶联吸附测定试剂盒
溴乙烷 AR,98%UP(Human Proteinuria) ELISA Kit 人尿蛋白兔胱天蛋白酶12(Casp12)酶联吸附测定试剂盒
N,O-双(硅烷)三氟 96%LMP7/PSMB99Human low molecular-weight protein/proteasome beta-type subunit) ELISA Kit 人低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9兔促状腺抗体(TSA)酶联吸附测定试剂盒
2-溴噻吩 98%Alpha2-MG(Human Alpha2 macroglobulin) ELISA Kit 人α2巨球蛋白兔血管**素样蛋白1(ANGPTL1)酶联吸附测定试剂盒
结肠癌氟尿嘧啶耐药株钠转运体抗体Elisa试剂盒PE-CY5标记的小鼠抗豚鼠IgGOLFM3/Optimedin 嗅球蛋白3抗体
钠转运体Elisa试剂盒APC标记的小鼠抗豚鼠IgGOLFM1 嗅球蛋白1抗体
黄色葡萄球的Cas9核酶Elisa试剂盒Alexa Fluor 350标记的小鼠抗豚鼠IgGOIF 骨诱导因子抗体
黄色葡萄球的Cas9核酶抗体Elisa试剂盒Alexa Fluor 488标记的小鼠抗豚鼠IgGO-GlcNAc transferase O位N-乙酰葡萄糖OGT抗体
环形交叉轴突导向受体同源物4Elisa试剂盒Alexa Fluor 555标记的小鼠抗豚鼠IgGOGG1/8 hydroxyguanine DNA glycosylase 8-羟鸟嘌呤DNA糖化酶
天冬酰內肽酶Elisa试剂盒Alexa Fluor 647标记的小鼠抗豚鼠IgGOGFOD2 末端多聚腺苷2蛋白抗体
TCF4Elisa试剂盒PE-Cy5.5标记的小鼠抗豚鼠IgGOGFOD1 末端多聚腺苷1蛋白抗体
正丝氨蛋白酶抑制剂E2Elisa试剂盒碱性酶（AP）标记的小鼠抗豚鼠IgGODZ3/Teneurin 3 固生蛋白3抗体
水痘带状疱疹病gE抗体Elisa试剂盒FITC标记的小鼠抗豚鼠IgGODF3B 外致密纤维蛋白3B抗体
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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