MSTO-211H细胞

产品名称：肺癌细胞株；MSTO-211H
形态特性：成纤维细胞样

生长特性：贴壁生长

特征特性：MSTO-211H细胞株是1985年从一位肺二相间皮瘤患者的胸水中建株的。这个病人接受过多种联合前期化疗。MSTO-211H细胞具有高亲和力的EGF结合位点，并表达神经元特异性烯醇酶(NSE)及人绒毛膜促性腺(HCG)的α与β亚基。未检测到多巴胺脱羧酶(DDC)，邦巴辛与神经tensin。细胞过表达CS-myc原癌基因，并没有观察到基因重排或扩增。V-src,v-abl,v-erbB,CS-raf1,Ha-ras,Ki-ras,和N-ras的表达呈阳性。未检测到N-m

培养条件：RPMI1640+10%FBS

传代方法：消化CQ-5分钟。1:2。3天内可长满。

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冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台；

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3,5-二氟 98%Human Protein S ELISA Kit  人蛋白S兔Ⅰ型胶原α1(COL1α1)酶联吸附测定试剂盒

4-氟-3-硝三氟 99%sEPCR(Human soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit  人可溶性血管内皮蛋白C受体兔胰岛素原(PI)酶联吸附测定试剂盒

5-氟-2-硝 97%C/EBP Epsilon (Human CCAAT/enhancer binding protein epsilon) ELISA Kit  人CCAAT增强子结合蛋白ε兔肿瘤蛋白P53(TP53)酶联吸附测定试剂盒

2,4-二吡啶 97%C/EBP Delta(Human CCAAT/enhancer binding protein deta) ELISA Kit  人CCAAT增强子结合蛋白δ兔质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)酶联吸附测定试剂盒

4-氨三氟 98%C/EBP Alpha(Human CCAAT/enhancer binding protein alpha) ELISA Kit  人CCAAT增强子结合蛋白α兔VI型胶原α1(COL6α1)酶联吸附测定试剂盒

3,5-二氨三氟 98%2,3-DPG(Human 2,3-Disphosphoglycerate,2) ELISA Kit  人2,3-二甘油兔胱天蛋白酶4(CASP4)酶联吸附测定试剂盒

苄三溴化膦 98%LUM(Human lumican) ELISA Kit  人膜聚糖/内腔蛋白兔封闭蛋白3(CLDN3)酶联吸附测定试剂盒

丁三化膦 98%NHE3(Human Na+/H+ exchanger 3) ELISA Kit  人Na+/H+交换体3兔信号传导转录激活因子6B(STAT56B)酶联吸附测定试剂盒

丁三溴化膦 99%OFQ/N(Human orphanin FQ/nociceptin) ELISA Kit  人孤腓肽兔可溶性肿瘤坏死因子-1(sTNF-1)酶联吸附测定试剂盒

苄三化 99%ST1(Human Stromelysin-1) ELISA Kit  人质裂解素兔抗状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)酶联吸附测定试剂盒  

三乙硅烷 98%ST2(Human Stromelysin-2) ELISA Kit  人质裂解素兔β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)酶联吸附测定试剂盒

代二膦 97%ST3(Human Stromelysin-3) ELISA Kit  人质裂解素兔铜蓝蛋白(CP)酶联吸附测定试剂盒

(3-羧)三溴化膦 98.0%LXA4(Human Lipoxin A4) ELISA Kit  人脂氧素A4兔黑色素瘤相关抗原(MAGE)酶联吸附测定试剂盒

1,3-二 99%PR3-ANCA(Human proteinase-antineutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit  人蛋白酶3特异性抗中性粒胞质抗体兔弹性蛋白酶3B(ELA3B)酶联吸附测定试剂盒  

二次膦酰 98%Beta-LPH(Human Beta-lipotropic hormone) ELISA Kit  人β-促脂素兔生长分化因子7(GDF7)酶联吸附测定试剂盒
MSTO-211H细胞蛋白络氨酶抗体Elisa试剂盒Alexa Fluor 488标记的兔抗牛IgMNrn1/Cpg15/Neuritin  转化神经突起蛋白抗体

顺乌头酶1Elisa试剂盒Alexa Fluor 555标记的兔抗牛IgMNRIP  雄受体复合物相关蛋白抗体（核受体相互作用蛋白）

酮激酶同工酶R;LElisa试剂盒碱性酶（AP）标记的兔抗牛IgMNRH2  死亡结构域蛋白NRH2抗体

CD320分子Elisa试剂盒罗丹明标记的兔抗鸡IgGNRG3  神经调节蛋白3抗体

β2转铁蛋白Elisa试剂盒胶体金标记的兔抗鸡IgGNRG1/HRG beta 1  癌分化因子P45抗体 Heregulinβ

维生素B9Elisa试剂盒Alexa Fluor 555标记的兔抗鸡IgGNrf2  核因子2相关因子2抗体

性别决定区Y框蛋白1Elisa试剂盒碱性酶（AP）标记的兔抗鸡IgGNRF-1  核呼吸因子-1抗体

骨骼肌肌动蛋白α1Elisa试剂盒生物素标记的兔抗鸡IgGNRAS  原癌因N-Ras抗体

心肌肌钙蛋白TElisa试剂盒Cy3标记的兔抗鸡IgGNR2F2/NR2F1  载脂蛋白AI调节蛋白1抗体