产品名称:膜间皮细胞;MeT-5A
生长特性:贴壁生长
培养条件:M199+10%FBS+3.3nMEGF+400nMhydrocortisone+870nMInsulin
(氢化可的松)
传代方法:1:2传代
产品名称
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规格
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货号
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MeT-5A细胞
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T25
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FS-X3255
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冻存培养基:
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案:
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
实验材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个;
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个,细胞培养瓶1个
5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块;
7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;
8、酒精灯1台;
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
5-氟胞嘧啶核苷 97%mIgM(Human membrane IgM) ELISA Kit 人表面膜球蛋白M兔骨保护素(OPG)酶联吸附测定试剂盒
鸟嘌呤核苷 99%mIgD(Human membrane IgD) ELISA Kit 人表面膜球蛋白D兔端锚聚合酶1 (TNKS1)酶联吸附测定试剂盒
鸟嘌呤核苷 99.5%,用于培养KIR(Human killer cell immnoglobulin-like receptor) ELISA Kit 人杀伤球蛋白样受体兔软骨寡聚质蛋白(COMP)酶联吸附测定试剂盒
次 99%KLR(Human killer cell lectin-like receptor) ELISA Kit 人杀伤凝集素样受体兔糖原合成酶激酶3α(GSK3α)酶联吸附测定试剂盒
5--2'-脱氧尿苷 99%APC(Human activated protein C) ELISA Kit 人活化蛋白C兔血小板激活因子(PAF)酶联吸附测定试剂盒
肌苷 98%Human Protein C ELISA Kit 人蛋白C兔白介素16(IL-16)酶联吸附测定试剂盒
5-尿苷 99%PF-3(Human plaet factor 3) ELISA Kit 人血小板因子3兔质金属蛋白酶2(MMP-2)酶联吸附测定试剂盒
N4-乙酰胞嘧啶 98%F1+2(Human prothrombin fragment 1+2) ELISA kit 人凝血酶原片段F1+2兔Runt相关转录因子2(RUNX2)酶联吸附测定试剂盒
2',3'-异叉腺苷 98%MBP/MBL(Human Mannma binding protein/mannan binding lectin) ELISA Kit 人甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素兔辅肌动蛋白α2 (ACTN2)酶联吸附测定试剂盒
利巴韦林 98%MAC(Human membrane attack complex) ELISA Kit 人膜攻击复合物兔周期素依赖性激酶9(CDK-9)酶联吸附测定试剂盒
1-乙酰-2,3,5-三酰氧-1-beta-D-呋喃核糖 98%EL(Human EuglobulinLysis) ELISA Kit 人优球蛋白兔神经纤维网蛋白1(NRP1)酶联吸附测定试剂盒
β-胸苷 99%f-Hb(Human free haemoglobin) ELISA Kit 人游离血红蛋白兔相关血浆蛋白2(PAPPA2)酶联吸附测定试剂盒
四乙酰核糖 98%PRM1(Human Protamine 1) ELISA Kit 人鱼精蛋白1兔L氨解氨酶(PAL)酶联吸附测定试剂盒
阿糖尿苷 98%HbCO(Human carboxyhemoglobin) ELISA Kit 人一氧化碳血红蛋白兔中期因子(MK)酶联吸附测定试剂盒
尿嘧啶 99%PAIg(Human plaet-associated immunoglobulins) ELISA Kit 人血小板相关球蛋白兔接触蛋白2(CNTN2)酶联吸附测定试剂盒
MeT-5A细胞脂蛋白相关脂酶A2Elisa试剂盒辣根过氧化物酶标记的兔抗羊IgMNKA 神经激肽A抗体
降解加速因子Elisa试剂盒辣根过氧化物酶标记的兔抗豚鼠IgGNK-2R 神经激肽A受体/K物质受体抗体
血小板特异性抗原Elisa试剂盒胶体金标记的兔抗豚鼠IgGNitrotyrosine 硝酪氨抗体
抗胰蛋白酶Elisa试剂盒生物素标记的兔抗豚鼠IgGNIT2 NIT2蛋白抗体
诱导型NO合酶Elisa试剂盒Cy3标记的兔抗豚鼠IgGNIT1 水解酶1抗体
犬尿喹啉Elisa试剂盒Cy5标记的兔抗豚鼠IgGNIS 钠转运体蛋白抗体
Ras相关C3肉素底物1Elisa试剂盒Cy5.5标记的兔抗豚鼠IgGNIRF/RNF107 环指蛋白107抗体
肽-主要组织相容性复合体复合物Elisa试剂盒Cy7标记的兔抗豚鼠IgGNIR2 膜脂转移蛋白1抗体
跨膜丝氨蛋白143Elisa试剂盒PE标记的兔抗豚鼠IgGNIR1/RDGBA3 膜相关脂转运蛋白抗体
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