HFL1细胞

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产品名称：肺成纤维细胞；HFL1
形态特性：成纤维细胞样

生长特性：贴壁生长

特征特性：该细胞为稳定二倍体细胞。

培养条件：F12K+10%FBS

传代方法：消化CQ-5分钟。1:2。3天内可长满。
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台； 

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 

偶氮 97%C1INH(Human Complement 1 inhibitor autoantibody) ELISA Kit  人补体1抑制物抗体兔纤蛋白原(FG)酶联吸附测定试剂盒

偶氮 分析标准品BF(Human factor B) ELISA Kit  人B因子兔脂氧素A4(LXA4)酶联吸附测定试剂盒

吖啶酮 98%HLA-G(Human leukocyte antigen G) ELISA Kit  人类白抗原G兔肾损伤分子1(KIM-1)酶联吸附测定试剂盒

溴化乙酰胆碱 98%C3b(Human Complement fragment 3b) ELISA Kit  人补体片断3b兔角蛋白18(CK-18/KRT18)酶联吸附测定试剂盒  

二-2-氨乙酯 98%C4b(Human Complement fragment 4b) ELISA Kit  人补体片断4b兔结构特异性识别蛋白1(SSRP1)酶联吸附测定试剂盒

3-氨-4-羟 97%C4d(Human Complement fragment 4d) ELISA Kit  人补体片断4d兔心脏肌球蛋白结合蛋白C(MYBPC3)酶联吸附测定试剂盒

3-氨酰 98%C5b(Human Complement fragment 5b) ELISA Kit  人补体片断5b兔胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)酶联吸附测定试剂盒

5-氨-1-戊 97%IgH(Human immunoglobulin heavy chain) ELISA Kit  人球蛋白重链兔大肠癌专一抗原3(CCSA-3)酶联吸附测定试剂盒

松香 75%IgHV(Human immunoglobulin heavy chain variable region) ELISA Kit  人球蛋白重链可变区兔协同激分子受体(CMR)酶联吸附测定试剂盒  

4-乙酰氨 99%poly-IgR(polyimmunoglobulinreceptor) ELISA Kit  人多球蛋白受体兔胎球蛋白A(FETUA)酶联吸附测定试剂盒

5-氨戊 97%Hb-AGE(Human hemoglobin-advanced glycosylation end products) ELISA Kit  人血红蛋白晚期糖化终末产物兔脂酶A2受体1(PLA2R1)酶联吸附测定试剂盒

硫 AR,99.0%mIgA(Human membrane IgA) ELISA Kit  人表面膜球蛋白A兔Apelin蛋白(APLN)酶联吸附测定试剂盒

蒽 96%Ig-j(Human immunoglubin joining chain) ELISA Kit  人球蛋白j链兔凝血因子Ⅶ(F7)酶联吸附测定试剂盒  

阿脲，一水  98%HB- Beta(Human Beta-subunits of hemoglobin) ELISA Kit  人血红蛋白β亚兔弹性蛋白酶4(ELA4)酶联吸附测定试剂盒  

乙缩 Standard for GC，>99%（GC)SIgA(Human secretory immunoglobulin A) ELISA Kit  人型球蛋白A兔Corin蛋白(CRN)酶联吸附测定试剂盒
HFL1细胞5-羟色受体1B抗体Elisa试剂盒PE-Cy5.5标记的兔抗豚鼠IgGNIFK  KI67相互作用蛋白抗体

胃泌素17抗体Elisa试剂盒PE-Cy7标记的兔抗豚鼠IgGNidogen 2  巢蛋白NID2抗体

含半胱氨丰富蛋白LCCL域蛋白2Elisa试剂盒罗丹明标记的兔抗豚鼠IgGNicastrin  老年性痴呆蛋白APH2抗体

状瘤病抗体18型Elisa试剂盒Cy5.5标记的兔抗豚鼠IgMNHLRC3  非霍奇金瘤重复蛋白3抗体

蓖麻素Elisa试剂盒Cy7标记的兔抗豚鼠IgMNHLRC2  非霍奇金瘤重复蛋白2抗体

硬皮病Elisa试剂盒PE标记的兔抗豚鼠IgMNHLRC1  肌痉挛性癫痫病相关EPM2蛋白抗体

硬皮病Elisa试剂盒罗丹明标记的兔抗豚鼠IgMNHEDC2  线粒体钠/氢交换蛋白质2抗体

抗多发性肌炎硬皮病抗体Elisa试剂盒FITC标记的兔抗豚鼠IgMNHE1/APNH1  钠氢通道蛋白抗体

载脂蛋白DElisa试剂盒碱性酶（AP）标记的兔抗豚鼠IgMNGX6  鼻咽癌相关因6抗体