实验材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个，细胞培养瓶1个
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块；
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；
8、酒精灯1台；
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产品名称
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规格
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货号
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OPM-2细胞
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T25
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FS-X3259
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产品名称：骨髓瘤细胞；OPM-2
生长特性：悬浮生长
培养条件：DMEM(高糖）+10%FBS(GIBCO)
传代方法：1：2传代
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冻存培养基：
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
氧化金 金含量≥88.6 %LAC/LA(Human lupus anticoagulant) ELISA Kit 人狼疮抗凝抗体兔肝配蛋白A1 (EFNA1)酶联吸附测定试剂盒
3-乙酰-2,5-二噻吩 99%Human soluble fibrin monomer complex,SFMC ELISA Kit 人可溶性血纤蛋白单体复合物兔金属硫蛋白3 (MT3)酶联吸附测定试剂盒
2-乙酰-5-呋喃 98%Human sreum albumin,HSA ELISA Kit 人血清白蛋白兔雌受体β(ERβ)酶联吸附测定试剂盒
2-乙酰-5-噻吩 98%Human 2,3-dinor thromboxane B2,2,3-dinor-TXB2 ELISA Kit 人2,3Dinor血栓烷B2兔唾液(SA)酶联吸附测定试剂盒
3-乙酰苄 98%Human 11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 ELISA Kit 人11去氢血栓烷B2兔抗性酶(ACP5)酶联吸附测定试剂盒
4-氮杂并咪唑 99%Human thrombomodulin,TM ELISA Kit 人血栓调节蛋白兔鸟苷环化酶激活因子2A(GUCA2A)酶联吸附测定试剂盒
1-氨-2-萘酚盐盐 97%Human Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI ELISA Kit 人纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物兔单核趋化蛋白3(MCP-3)酶联吸附测定试剂盒
1-氨-2-萘酚盐盐 工业级，90%Human plaet membrane glycoprotein II b III a,GP- II b III a ELISA Kit 人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa兔脂酰肌蛋白聚糖4(GPC4)酶联吸附测定试剂盒
2-氨-4--6-嘧啶 98%Human thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit 人血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1兔可溶性糖蛋白130(sgp130)酶联吸附测定试剂盒
2-氨-5-噻唑盐盐 97%Human alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit 人血浆α颗粒膜蛋白兔硫乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)酶联吸附测定试剂盒
1-(2-氨乙) 98%Human terminal complement complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit 人末端补体复合物C5b-9兔P62抗体(AP62A)酶联吸附测定试剂盒
5-氨-2-吡啶 97%Human Complement 4,C4 ELISA Kit 人补体蛋白4兔巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α)酶联吸附测定试剂盒
5-氨吲唑 98%Human Complement 3,C3 ELISA Kit 人补体蛋白3兔肽聚糖识别蛋白S(PGRP-S)酶联吸附测定试剂盒
5-氨-4,6-二嘧啶 98%Human coagulation factor II ,F II ELISA Kit 人凝血因子Ⅱ兔色素上皮衍生因子(PEDF)酶联吸附测定试剂盒
6-氨并噻唑 98+%Human leucocyte antigen B27,HLA-B27 ELISA Kit 人类白抗原B27兔失调症蛋白质2(ATXN2)酶联吸附测定试剂盒
OPM-2细胞乙脱氢酶Elisa试剂盒Alexa Fluor 555标记的兔抗豚鼠IgMNF-κB p105/p50(Phospho-Ser373) 化核因子p50/k因结合核因子抗体
盐皮质Elisa试剂盒辣根过氧化物酶标记的兔抗马IgGNFX1 核转录因子X盒结合蛋白1抗体
膜联蛋白ⅡElisa试剂盒生物素标记的兔抗马IgGNF-M/Neurofilament M 中分子量神经丝蛋白抗体
血管内皮钙黏蛋白Elisa试剂盒APC标记的兔抗马IgGNF-L/Neurofilament L/Neurofilament 68 低分子量神经丝蛋白抗体
细螺旋体病IgM 抗体Elisa试剂盒Alexa Fluor 350标记的兔抗马IgGNFKBIB/IKB beta 核因子κB抑制蛋白β抗体
胆碱转运体样蛋白4Elisa试剂盒Alexa Fluor 488标记的兔抗马IgGNFKBIA/IKB alpha 核因子κB抑制蛋白α抗体
膜联蛋白XIElisa试剂盒Alexa Fluor 555标记的兔抗马IgGNFKB p65 核因子/k因结合核因子抗体
细螺旋体病IgG抗体Elisa试剂盒Alexa Fluor 647标记的兔抗马IgGNFKB p52/NFKB2 核因子/k因结合核因子 p52/p100抗体
卵泡抑素样蛋白1Elisa试剂盒PE-Cy5.5标记的兔抗马IgGNFkB p105/p50 核因子p50/k因结合核因子抗体
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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