HepG2细胞

产品名称：肝癌细胞；HepG2
形态特性：上皮样

生长特性：贴壁生长

特征特性：该细胞来源于一名15岁的白人少年的肝癌组织。该细胞表达甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-CQ-E抗胰蛋白酶、转铁蛋白、α-CQ-E抗凝乳蛋白酶、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、纤溶酶原、补体C4、C3激活物、纤维蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、视黄醇结合蛋白；表达胰岛素受体和胰岛素样生长因子IGFⅡ的受体；该细胞具有CQ-羟基-CQ-甲酰辅酶A还原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未证明该细胞中有HBV基因组。

培养条件：DMEM(高糖）+10%FBS

传代方法：1：2传代

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冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台；

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3,5-二酚 分析标准品Human ox-LDL ELISA Kit  人氧化低密度脂蛋白兔外生骨疣蛋白1(EXT1)酶联吸附测定试剂盒

3,5-二酚 98%Human ALR ELISA Kit  人肝再生增强因子兔热休克转录因子1(HSF1)酶联吸附测定试剂盒

2,5-二硫二脲 99%Human T-box protein 3 ELISA Kit(human)  人转录因子Tbx3 ELISA试剂盒兔重组激活因1(RAG-1)酶联吸附测定试剂盒

1,2-二乙 97%human HMGB-1 ELISA Kit  人高迁移率族蛋白B1 ELISA Kit兔球蛋白G Fc段结合蛋白(FcγBP)酶联吸附测定试剂盒

1,2-二乙 Standard for GC,≥99.0% (GC)GATA4 ELISA Kit muman  人GATA结合蛋白4 ELISA试剂盒兔核孔蛋白188kda(NUP188)酶联吸附测定试剂盒

1,5-二羟萘 98% ACV-RAb(Rat anti-Activin A receptor antibody,ACV-RAb )ELISA Kit  大鼠活化素A受体抗体兔亮氨酰氨肽酶(LAP)酶联吸附测定试剂盒

2,5-二羟 97%NGB(Rat Neuroglobin,NGB) ELISA Kit  大鼠脑红蛋白兔胰岛素样生长因子2(IGF-2)酶联吸附测定试剂盒

2,6-二溴醌亚 99%TPO(Rat Thrombopoietin,TPO )ELISA kit  大鼠血小板**素兔二氢嘧啶脱氢酶(DPYD)酶联吸附测定试剂盒

2,3-二氨萘 荧光级，>97% (HPLC)(BAX)Rat Bcl-2 associated X protein,Bax ELISA Kit  大鼠Bcl-2相关X蛋白兔蛋白聚糖4(PRG4)酶联吸附测定试剂盒

2,6-二氧 98%sFAS/Apo-1(Rat soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 )ELISA Kit  大鼠可溶性凋亡相关因子兔粘蛋白7(MUC7)酶联吸附测定试剂盒

4,5-二咪唑 98%MBP/MBL (Rat Mannma binding protein/mannan binding lectin,MBP/MBL) ELISA Kit  Rat Mannma binding protein/mannan binding lectin兔脂酶Cγ1(PLCγ1)酶联吸附测定试剂盒

4,5-二邻二 98%IL-7(Rat Interleukin-7) ELISA kit  大鼠白介素7兔性酶1(ACP1)酶联吸附测定试剂盒

二硅烷 98%STK(Reat serine/threonine protein kinase,STK) ELISA Kit  大鼠丝氨/苏氨蛋白酶兔神经肽Y受体Y1(NPYR1)酶联吸附测定试剂盒

2,6-二氟二酮 98%RBC(Rat anti-red cell antibody )ELISA Kit  大鼠抗红抗体兔解整合素金属蛋白酶8(ADAM8)酶联吸附测定试剂盒

3,4-二氟二酮 98%CD3(Rat Cluster of differentiation 3,CD3) ELISA Kit  大鼠CD3分子兔纤溶酶(Fbn)酶联吸附测定试剂盒
HepG2细胞流行性出血热抗体Elisa试剂盒Alexa Fluor 555标记的兔抗小鼠IgGNADE/NGFRAP1  神经生长因子受体相关蛋白1抗体

流行性出血热Elisa试剂盒PE-Cy5.5标记的兔抗小鼠IgGNa+/K+-ATPase Alpha1  Na+/K+-ATPase α1 钠ATP酶α1多肽抗体

再生胰岛衍生蛋白3αElisa试剂盒PE-Cy7标记的兔抗小鼠IgGN acetylglucosamine kinase  N-乙酰氨葡萄糖激酶抗体

皮肤衍生肽酶抑制因子3Elisa试剂盒生物素标记的兔抗小鼠IgMMyt1  髓鞘转录因子1抗体

胆色素原脱氨酶Elisa试剂盒辣根过氧化物酶标记的兔抗小鼠IgMMYSM1  MYSM1抗体

辅肌动蛋白α2Elisa试剂盒Cy5标记的兔抗小鼠IgMMYRIP/SLAC2-C  MYRIP蛋白抗体

尿微量白蛋白Elisa试剂盒Cy5.5标记的兔抗小鼠IgMMYPT1/MBS  肌球蛋白酶抗体

谷氨受体5亚型Elisa试剂盒Cy7标记的兔抗小鼠IgMMYOZ/MYOZ1  MYOZ抗体

Grim19Elisa试剂盒PE标记的兔抗小鼠IgMMyotilin  肌收缩蛋白MYOT抗体