产品名称：肺腺癌细胞；Calu-3
形态特性：上皮样
生长特性：贴壁生长
特征特性：该细胞是从一名25岁的白人男性肺腺癌患者的胸水中分离建立的；该患者曾使用过环磷酰胺、博来霉素、阿霉素进行。该细胞接种至裸鼠可成瘤；可作转染宿主。
培养条件：MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalanCA-dSalts)10%FBS
传代方法：消化20分钟。1:2。5-6天长满。
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产品名称
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规格
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货号
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Calu-3细胞
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T25
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FS-X3286
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冻存培养基：
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
实验材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个，细胞培养瓶1个
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块；
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；
8、酒精灯1台；
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
三氧化铼 98%GR- Alpha ELISA Kit 大鼠糖皮质受体α兔肝脏糖原化酶(PYGL)酶联吸附测定试剂盒
2-环己酮 98%Col IV ELISA KIT 大鼠Ⅳ型胶原兔唾液乙酰酯酶(SIAE)酶联吸附测定试剂盒
2-乙烯 98%HK ELISA Kit 大鼠己糖激酶兔脂质运载蛋白1(LCN1)酶联吸附测定试剂盒
4-硫硫酚 96%GSK ELISA Kit 大鼠糖原合成酶激酶兔促卵泡素(FSH)酶联吸附测定试剂盒
4-硫 98%CXCL16 ELISA Kit 大鼠CXC趋化因子配体16兔外质糖蛋白(MEPE)酶联吸附测定试剂盒
吲哚-3-羧酯 99%u-T3 ELISA Kit 大鼠高敏状腺原氨兔神经生长因子(NGF)酶联吸附测定试剂盒
D-(+)-麦芽糖一水合物 AR,97%Bid ELISA Kit 大鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白兔α干扰素 (IFN-α)酶联吸附测定试剂盒
D-(+)-麦芽糖一水合物 ≥98.0% (HPLC)Casp-9 ELISA Kit 大鼠胱天蛋白酶9兔游离状腺素(fT4)酶联吸附测定试剂盒
麦芽糖 分析标准品Orexin A ELISA Kit 大鼠阿立新A兔甘露糖苷酶α1A类成员1(MAN1A1)酶联吸附测定试剂盒
2-氧 98%Casp-3 ELISA Kit 大鼠胱天蛋白酶3兔核糖核酶H(RNASEH)酶联吸附测定试剂盒
D-薄荷 99%Bcl-2 ELISA Kit 大鼠B瘤因子2兔骨碱性酶(BALP)酶联吸附测定试剂盒
2-戊烷 99%CXCR3 ELISA Kit 大鼠CXC趋化因子受体3兔前列腺素E合成酶微粒体(PTGES)酶联吸附测定试剂盒
(R)-(+)-α-氧-α-(三氟) 99%NE ELISA Kit 大鼠中性粒弹性蛋白酶兔松弛素/胰岛素样肽受体1(RXFP1)酶联吸附测定试剂盒
5-异噁唑-3-羧酯 98%TSGF ELISA Kit 大鼠肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子兔核糖体蛋白L26(RPL26)酶联吸附测定试剂盒
D(+)松三糖，一水 99%Hyp ELISA Kit 大鼠羟脯氨兔B激活抗原B7-2(LAB7-2/CD86)酶联吸附测定试剂盒
Calu-3细胞黄素腺嘌呤二核苷Elisa试剂盒PE-Cy7标记的兔抗水貂IgGMrpL28 线粒体核糖体蛋白L28抗体
乙酰胆碱受体IgG1抗体Elisa试剂盒碱性酶（AP）标记的兔抗水貂IgGMrpL12 线粒体核糖体蛋白L12抗体
组织相容性复合体Ⅰ类相关因BElisa试剂盒FITC标记的兔抗水貂IgGMRP9/ABCC12 多药耐药相关蛋白9抗体
早老素1Elisa试剂盒罗丹明标记的兔抗水貂IgGMRP8+MRP14 多药耐药相关蛋白8/9/14抗体
µ型受体Elisa试剂盒胶体金标记的兔抗水貂IgGMRP8/ABCC11 多药耐药相关蛋白8抗体
类缺陷病2Elisa试剂盒罗丹明标记的驴抗人IgGMRP7/ABCC10 多药耐药相关蛋白7抗体
凝血因子IaElisa试剂盒胶体金标记的驴抗人IgGMRP5/ABCC5 多药耐药相关蛋白5抗体
拓扑异构酶10Elisa试剂盒FITC标记的驴抗人IgGMRP4/ABCC4 多药耐药相关蛋白4抗体
金黄色葡萄球肠素DElisa试剂盒碱性酶（AP）标记的驴抗人IgGMRP3 多药耐药相关蛋白3抗体
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