产品名称：高转移肝癌细胞；MHCC97-H
形态特性：上皮样
生长特性：贴壁生长
特征特性：来源于中山医院，用人肝癌细胞株MHCC97-H接种裸鼠，进行3次肺转移筛选，取肺转移瘤建成皮下接种后高度自发性肺转移的肝癌细胞系
培养条件：DF+10%HS+5%FBS
传代方法：1：2传代
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产品名称
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规格
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货号
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MHCC97-H细胞
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T25
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FS-X3292
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冻存培养基：
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
实验材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个，细胞培养瓶1个
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块；
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；
8、酒精灯1台；
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
噁唑 98%SOD ELISA Kit 大鼠超氧化物歧化酶兔硫软骨素(CS)酶联吸附测定试剂盒
2-噻吩乙酰 98%HSP gp96 ELISA Kit 大鼠热休克蛋白糖蛋白96兔肌球蛋白重链10(MYH10)酶联吸附测定试剂盒
4-辛炔 99%CH50 ELISA Kit 大鼠血清总补体兔重组激活因2(RAG-2)酶联吸附测定试剂盒
十八 ≥97.0% (GC)B7-2/sCD86 ELISA Kit 大鼠可溶性CD86兔血凝素(HA)酶联吸附测定试剂盒
草酰 98%HIF-1 Alpha ELISA Kit 大鼠低氧诱导因子1α兔血小板衍生生长因子D(FDGFD)酶联吸附测定试剂盒
油 99%Amylin ELISA Kit 大鼠胰淀素兔唾液结合球蛋白样凝集素8(SIGLEC8)酶联吸附测定试剂盒
油 分析标准品，≥99.0% (GC)LTC4 ELISA Kit 大鼠白三烯C4兔蛋白脂质蛋白抗体(PLP)酶联吸附测定试剂盒
1,7-辛二炔 98%Cyt-C ELISA Kit 大鼠色素C兔EJ抗体/抗甘氨酰tRNA合成酶抗体(EJ/GlyRS)酶联吸附测定试剂盒
十八烷 99%Ang- I ELISA Kit 大鼠血管紧张素Ⅰ兔生长受体(GHR)酶联吸附测定试剂盒
十八烷 分析标准品，≥99.5% (GC)MC Ab ELISA Kit 大鼠黑色素抗体兔核糖核酶(RNASE)酶联吸附测定试剂盒
十八烷 Standard for GC, ≥99.5% (GC)DPP IV ELISA Kit 大鼠二肽肽酶Ⅳ兔胸腺嘧啶核苷化酶(TP)酶联吸附测定试剂盒
酮三化膦 99%C4a ELISA Kit 大鼠过敏素/补体片断4a兔蛋白酪氨酶受体K(PTPRK)酶联吸附测定试剂盒
丁位辛内酯 98%C5a ELISA Kit 大鼠补体片断5a兔胰岛素降解酶(IDE)酶联吸附测定试剂盒
4-戊烯 95%C3a ELISA Kit 大鼠补体片断3a兔GATA结合蛋白5(GATA5)酶联吸附测定试剂盒
锗试剂 97%FS ELISA Kit 大鼠卵泡抑素兔前动力蛋白受体1(PKR1)酶联吸附测定试剂盒
MHCC97-H细胞转化受体电位阳离子通道亚家族C成员1Elisa试剂盒PE-CY5标记的驴抗豚鼠IgGMouse Anti-Rabbit IgM/PE PE标记的小鼠抗兔IgM
亮氨氨肽酶Elisa试剂盒APC标记的驴抗豚鼠IgGMouse Anti-Rabbit IgM/HRP 辣根过氧化物酶标记的小鼠抗兔IgM
脂酰肌-4-Elisa试剂盒碱性酶（AP）标记的驴抗豚鼠IgGMouse Anti-Rabbit IgM/Gold 胶体金标记的小鼠抗兔IgM
黄素单氧化酶3Elisa试剂盒FITC标记的驴抗豚鼠IgGMouse Anti-Rabbit IgM/FITC FITC标记的小鼠抗兔IgM
Slit同源蛋白3Elisa试剂盒罗丹明标记的驴抗豚鼠IgGMouse Anti-Rabbit IgM/Cy7 Cy7标记的小鼠抗兔IgM
D-葡萄糖Elisa试剂盒罗丹明标记的鼠抗人IgG单克隆抗体Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy5.5 Cy5.5标记的小鼠抗兔IgM
CD138分子Elisa试剂盒胶体金标记的鼠抗人IgG单克隆抗体Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy5 Cy5标记的小鼠抗兔IgM
可溶性活化因-3Elisa试剂盒FITC标记的鼠抗人IgG单克隆抗体Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy3 Cy3标记的小鼠抗兔IgM
自然杀伤家族2成员DElisa试剂盒碱性酶（AP）标记的鼠抗人IgG单克隆抗体Mouse Anti-Rabbit IgM/Bio 生物素标记的小鼠抗兔IgM
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