C3A细胞

产品名称：永生化肝细胞;C3A
生长特性：贴壁生长

培养条件：DMEM(高糖）+10%FBS

传代方法：1：2传代

公司细胞现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条���下过夜。 
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台；

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

三银 98%TFPI ELISA Kit  大鼠组织因子途径抑制物兔肿瘤特异性移植抗原(TSTA)酶联吸附测定试剂盒

柠檬氢二钠 99%AQP-5 ELISA Kit  大鼠水通道蛋白5兔类粘蛋白2(ORM2)酶联吸附测定试剂盒

硫银 99%AQP-4 ELISA Kit  大鼠水通道蛋白4兔肾上腺素能α1A受体(ADRA1A)酶联吸附测定试剂盒

血清盐盐 ARAQP-3 ELISA Kit  大鼠水通道蛋白3兔泛素结合酶E2A(UBE2A)酶联吸附测定试剂盒  

溴化银 99.9%AQP-2 ELISA Kit  大鼠水通道蛋白2兔凝血酶原(PT)酶联吸附测定试剂盒

溴化银 98%AQP-1 ELISA Kit  大鼠水通道蛋白1兔内脂素(VF)酶联吸附测定试剂盒

铬钠，四水 GR，99%AQP-0 ELISA Kit  大鼠水通道蛋白0兔外信号调节激酶2(ERK2)酶联吸附测定试剂盒

2-磺 水合物 98%TG ELISA Kit  大鼠状腺球蛋白兔胰高血糖素(GC)酶联吸附测定试剂盒  

碳钠,一水 ACSINH-A ELISA Kit  大鼠抑制素A兔IgA Fc片段受体(FcaR)酶联吸附测定试剂盒

银 银含量, 77.0 % Beta-CG ELISA Kit  大鼠绒毛膜促性腺β兔瘦素受体(LEPR)酶联吸附测定试剂盒

盐肌氨 99%SHBG ELISA Kit  大鼠性结合球蛋白兔环氧合酶-2受体(COX-2R)酶联吸附测定试剂盒

碳钠,一水 99.999% metals basisDHEA-S7 ELISA Kit  大鼠脱氢表雄酮S7兔脑素受体(CNR1)酶联吸附测定试剂盒

硫钐(III),八水 99.9% metals basisDHEA ELISA Kit  大鼠脱氢表雄酮兔颗粒酶A(GzmA)酶联吸附测定试剂盒

间 99%HMGB-1 ELISA Kit  大鼠高迁移率族蛋白B1兔抗环胍氨肽抗体(ACCPA)酶联吸附测定试剂盒

4-(三氟)肼 96%PAPP-A ELISA Kit  大鼠相关血浆蛋白A兔胸腺肽α1(Ta1)酶联吸附测定试剂盒
C3A细胞高迁移率族AT Hook蛋白2Elisa试剂盒牛血清白蛋白（标准）Mouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记的小鼠抗人IgM

脂质转运蛋白2Elisa试剂盒髓鞘碱性蛋白(多肽）大鼠Mouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的小鼠抗人IgM

Notch同源物3Elisa试剂盒血管活性肠肽Mouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的小鼠抗人IgM

溶血卵脂酰转移酶2Elisa试剂盒神经节肽Mouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的小鼠抗人IgM

食道癌相关因2Elisa试剂盒胰高血糖素样肽-2蛋白Mouse anti-human IgM ascites  小鼠抗人IgM腹水

固调节因子结合蛋白1Elisa试剂盒活性依赖的神经保护肽(抗原）Mouse Anti-human IgM  小鼠抗人IgM

乙酰辅酶A羧化酶αElisa试剂盒α-1抗胰糜蛋白酶Mouse Anti-human IgG/RBITC  罗丹明标记的小鼠抗人IgG

CARD结构域的凋亡相关颗粒样蛋白Elisa试剂盒胰糜蛋白酶Mouse Anti-human IgG/PE-Cy7  PE-Cy7标记的小鼠抗人IgG

Crk样蛋白Elisa试剂盒促肾上腺皮质（18-39）(抗原)Mouse Anti-human IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的小鼠抗人IgG