HEL细胞

实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台；

产品名称：红白细胞白血病细胞；HEL
形态特性：母细胞样

生长特性：悬浮生长

特征特性：这株母细胞样细胞株，源自一位30岁白人男性一，患有恶性红细胞白血病，能够自然产生并能诱导球蛋白合成。细胞的EB病毒核抗原阴性，没有表面球蛋白与细胞质球蛋白。HEL细胞表达HLA抗原(HLA-A3,AW32,BW35),β-2小球蛋白，一定比例的细胞还表达Ia抗原。这个细胞株提供了一种用于研究红细胞分化和球蛋白基因表达的模型。它类似于小鼠中的血友病。

培养条件：RPMI1640+10%FBS

传代方法：1:2。3天内可长满。

公司细胞现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 
4-(2-噻唑偶氮)间二酚 97%IL-1 ELISA Kit  大鼠白介素1豚鼠白介素6(IL-6)酶联吸附测定试剂盒

2,3,5,6-四氟酚 AR,98.0%  IL-1 Beta ELISA Kit  大鼠白介素1β豚鼠接触蛋白2(CNTN2)酶联吸附测定试剂盒

3,4-二硫酚 97%MYO/MB ELISA Kit  大鼠肌红蛋白豚鼠白介素12(IL-12)酶联吸附测定试剂盒

化四砷 97%TXB2 ELISA Kit  大鼠血栓素B2豚鼠钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1)酶联吸附测定试剂盒

三化铵 99%Ach ELISA Kit  大鼠乙酰胆碱豚鼠结缔组织生长因子(CTGF)酶联吸附测定试剂盒

硝 99.999%（剧品）TRH ELISA Kit  大鼠促状腺素释放豚鼠热休克转录因子2(HSF2)酶联吸附测定试剂盒

N-(硅烷)乙酰 97%ATGA/TGAB ELISA Kit  大鼠抗状腺球蛋白抗体豚鼠白介素17(IL-17)酶联吸附测定试剂盒

N-(硅烷)乙酰 95%CRH ELISA Kit  大鼠促肾上皮质释放豚鼠结蛋白(Des)酶联吸附测定试剂盒

三(2-呋喃)膦 99%GnRH ELISA Kit  大鼠促性腺释放豚鼠凝血因子XI(F11)酶联吸附测定试剂盒  

4-(三氟氧) 97%LTB4 ELISA Kit  大鼠白三烯B4豚鼠半凝集素3(GAL3)酶联吸附测定试剂盒

3-(三氟)苄 98%LIFR ELISA Kit  大鼠白血病抑制因子受体豚鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)酶联吸附测定试剂盒

4-(三氟) 99%EGF ELISA Kit  大鼠表皮生长因子豚鼠癌易感蛋白1(BRCA1)酶联吸附测定试剂盒

1-(3-三氟)哌 98%iFABP ELISA Kit  大鼠肠脂肪结合蛋白豚鼠神经特异性烯化酶(NSE)酶联吸附测定试剂盒

4-(三氟) 98%TE ELISA Kit  大鼠端粒酶豚鼠β2糖蛋白1(β2-GP1)酶联吸附测定试剂盒

三(2-噻吩)膦 98+%MMP-5 ELISA Kit  大鼠质金属蛋白酶5豚鼠着丝粒蛋白F(CENPF)酶联吸附测定试剂盒
HEL细胞Synerginγ蛋白Elisa试剂盒粒-巨噬集落激因子3抗原Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy5.5  Cy5.5标记的鼠抗人IgG单克隆抗体

Strabismus蛋白Elisa试剂盒肺表面活性蛋白B抗原Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy5  Cy5标记的鼠抗人IgG单克隆抗体

Stomatin蛋白Elisa试剂盒阳离子转运蛋白1Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy3  Cy3标记的鼠抗人IgG单克隆抗体

监理蛋白Elisa试剂盒质金属蛋白酶-9(抗原)Mouse Anti-human IgG(3D3)/Bio  生物素标记的鼠抗人IgG单克隆抗体

14-3-3蛋白etaElisa试剂盒晚期糖化终末产物特异性受体(抗原）Mouse Anti-human IgG(3D3)/APC  APC标记的鼠抗人IgG单克隆抗体

碳酐酶3Elisa试剂盒14-3-3 蛋白（多肽抗原）Mouse Anti-human IgG(3D3)/AP  碱性酶（AP）标记的鼠抗人IgG单克隆抗体

碳酐酶9Elisa试剂盒植物14-3-3蛋白抗原Mouse Anti-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记的鼠抗人IgG单克隆抗体

碳酐酶4Elisa试剂盒FRA-1多肽蛋白Mouse Anti-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的鼠抗人IgG单克隆抗体

碳酐酶5Elisa试剂盒调亡诱导因子(多肽片断抗原）Mouse Anti-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的鼠抗人IgG单克隆抗体
细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。