产品名称:肝星形细胞;LX-2
生长特性:贴壁生长
培养条件:DMEM(高糖)+10%FBS
传代方法:1:3传代,2-3天换液一次
产品名称
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规格
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货号
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LX-2细胞
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T25
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FS-X3305
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冻存培养基:
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案:
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
实验材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个;
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个,细胞培养瓶1个
5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块;
7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;
8、酒精灯1台;
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3-硅烷炔 97%ICAM-2/CD102 ELISA Kit 大鼠间粘附分子2豚鼠氨羟化酶 (PAH)酶联吸附测定试剂盒
5-硅烷-4-戊炔-1- 96%ICAM-3/CD50 ELISA Kit 大鼠间粘附分子3豚鼠主要穹窿蛋白(MVP)酶联吸附测定试剂盒
四锡 97%PAI-1 ELISA Kit 大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1豚鼠芳香酶(ARO)酶联吸附测定试剂盒
二氢化钛 -325目,99%PAI ELISA Kit 大鼠纤溶酶原激活物抑制因子豚鼠葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)酶联吸附测定试剂盒
氮化钽 5 μm,99.5% metals basisFDP ELISA Kit 大鼠血纤蛋白原降解产物豚鼠肌-3-激酶2α肽(PI3K2α)酶联吸附测定试剂盒
10-十一烯 98%TM ELISA Kit 大鼠血栓调节蛋白豚鼠抗糖脂抗体(AGA)酶联吸附测定试剂盒
十一 98%PDGF ELISA Kit 大鼠血小板衍生生长因子豚鼠半凝集素9(GAL9)酶联吸附测定试剂盒
十一 分析标准品,>99.5%(GC)OxLDL ELISA Kit 大鼠氧化低密度脂蛋白豚鼠ras同源物因家族成员a(RHOA)酶联吸附测定试剂盒
十一 Standard for GC, ≥99.0% (GC)PAF ELISA Kit 大鼠血小板活化因子豚鼠白分化抗原CD97(CD97)酶联吸附测定试剂盒
环氧丁烷 98%P III NT ELISA Kit 大鼠Ⅲ型前胶原氨端肽豚鼠抗原提呈相关转运蛋白(TAP)酶联吸附测定试剂盒
2-乙酰 97%Col III ELISA Kit 大鼠Ⅲ型胶原豚鼠球蛋白A Fc段受体(FcαR/CD89)酶联吸附测定试剂盒
2-乙烯萘 97%CRP ELISA Kit 大鼠C反应蛋白豚鼠β1连接素(CTNNβ1)酶联吸附测定试剂盒
4-乙烯吡啶 96% TPA ELISA Kit 大鼠组织多肽抗原豚鼠膜联蛋白A5(ANXA5 )酶联吸附测定试剂盒
紫脲 97%t-PA ELISA Kit 大鼠组织型纤溶酶原激活剂豚鼠成纤维生长因子23(FGF23)酶联吸附测定试剂盒
乙烯硅烷 97%TF ELISA Kit 大鼠组织因子豚鼠接触蛋白相关蛋白样蛋白2(CNTNAP2)酶联吸附测定试剂盒
LX-2细胞谷胱甘肽过氧化物酶4Elisa试剂盒胰岛素原Mouse Anti-Guinea pig IgG/PE PE标记的小鼠抗豚鼠IgG
检测Arl6ip5Elisa试剂盒肾上腺髓质素受体(抗原)Mouse Anti-Guinea pig IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的小鼠抗豚鼠IgG
肝癌源性生长因子Elisa试剂盒纤溶酶原激活物抑制因子Mouse Anti-Guinea pig IgG/Gold 胶体金标记的小鼠抗豚鼠IgG
自噬相关蛋白5Elisa试剂盒角蛋白7Mouse Anti-Guinea pig IgG/FITC FITC标记的小鼠抗豚鼠IgG
自噬相关蛋白7Elisa试剂盒异硫荧光素(FITC)标记糖尿病相关肽1-37Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy7 Cy7标记的小鼠抗豚鼠IgG
β-己糖酶亚αElisa试剂盒凋亡蛋白活性因子-1(抗原)Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的小鼠抗豚鼠IgG
亚硝谷胱甘肽还原酶Elisa试剂盒凋亡蛋白活性因子-1(抗原)Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy5 Cy5标记的小鼠抗豚鼠IgG
补体成分1q受体Elisa试剂盒雄受体(多肽抗原)Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy3 Cy3标记的小鼠抗豚鼠IgG
肾母过度表达因Elisa试剂盒5-羟色受体2A抗原Mouse Anti-Guinea pig IgG/Bio 生物素标记的小鼠抗豚鼠IgG
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