HIBEpiC细胞

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产品名称：肝内胆管上皮细胞；HIBEpiC
培养条件：上皮细胞培养基，scienCA-ll，货号：4101
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台； 

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 

碳化硅 99%,0.5～0.7umLIF ELISA Kit  大鼠白血病抑制因子豚鼠脱氢酶C(LDHC)酶联吸附测定试剂盒  

碳化硅 ≥99.00L-Selectin/CD62L ELISA Kit  大鼠L选择素豚鼠破骨相关受体(OSCAR)酶联吸附测定试剂盒

纳米碳化硅 99.9% metals basis,40nmMCP-1/CCL2/MCAF ELISA KIT  大鼠单核趋化蛋白1豚鼠Bcl2同源拮抗剂1(BAK1)酶联吸附测定试剂盒

芹菜素 分析标准品，≥98%MCP-2/CCL8 ELISA Kit  大鼠单核趋化蛋白2豚鼠糖皮质受体α(GRα)酶联吸附测定试剂盒

黄芩素 分析标准品，≥98%MCP-3/CCL7 ELISA Kit  大鼠单核趋化蛋白3豚鼠补体因子1R(Clr)酶联吸附测定试剂盒

黄芩苷 95%M-CSF ELISA Kit  大鼠巨噬集落激因子豚鼠质裂解蛋白/质溶素(MAT)酶联吸附测定试剂盒

秋水仙碱 98%MDC/CCL22 ELISA Kit  大鼠巨噬来源的趋化因子豚鼠蕈碱型乙酰胆碱受体(M-AChR)酶联吸附测定试剂盒

绿原 95%MIP-2 ELISA Kit  大鼠巨噬炎性蛋白2豚鼠丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)酶联吸附测定试剂盒

绿原 分析标准品，≥98%MIP-3 Beta/ELC/CCL19 ELISA Kit  大鼠巨噬炎性蛋白3β豚鼠质金属蛋白酶-13(MMP-13)酶联吸附测定试剂盒

绿原 98%MMP-1 ELISA kit   大鼠质金属蛋白酶1豚鼠F-框蛋白2(FBXO2)酶联吸附测定试剂盒  

白杨素 分析标准品，>98% MMP-10 ELISA kit   大鼠质金属蛋白酶10豚鼠血管舒缓激肽(BK)酶联吸附测定试剂盒  

七叶苷（倍半水） 98%MMP-13 ELISA kit   大鼠质金属蛋白酶13豚鼠脂酶A2激活蛋白(PLAA)酶联吸附测定试剂盒

七叶苷（倍半水） 分析标准品，>99.9%(HPLC)MMP-3 ELISA kit   大鼠质金属蛋白酶3豚鼠水通道蛋白2(AQP-2)酶联吸附测定试剂盒

大黄素 ≥90% (HPLC)MMP-7 ELISA kit   大鼠质金属蛋白酶7豚鼠β甘露糖苷酶(β Manase)酶联吸附测定试剂盒

大黄素 分析标准品，≥96.0% (HPLC)MMP-2/Gelatinase A ELISA Kit   大鼠质金属蛋白酶2/明胶酶A豚鼠黑素瘤黏附分子(MCAM)酶联吸附测定试剂盒
HIBEpiC细胞II型链球抗体Elisa试剂盒Mouse Anti-Goat IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的小鼠抗羊IgG

抗内因子抗体Elisa试剂盒整合素连接激酶-1Mouse Anti-Goat IgG/PE-CY5  PE-CY5标记的小鼠抗羊IgG

谷氨脱氢酶2Elisa试剂盒芳香化酶（抗原）Mouse Anti-Goat IgG/PE-Cy3  PE-Cy3标记的小鼠抗羊IgG

17α羟孕酮Elisa试剂盒肺表面活性蛋白C抗原Mouse Anti-Goat IgG/PE  PE标记的小鼠抗羊IgG

多配体蛋白聚糖2Elisa试剂盒肥大类糜蛋白酶1Mouse Anti-Goat IgG/HRP  辣根过氧化物酶标记的小鼠抗羊IgG

叉头蛋白O3αElisa试剂盒铜蓝蛋白抗原Mouse Anti-Goat IgG/Gold  胶体金标记的小鼠抗羊IgG

7α-羟胆固Elisa试剂盒趋化素样蛋白Mouse Anti-Goat IgG/FITC  FITC标记的小鼠抗羊IgG

CD68分子Elisa试剂盒Mouse Anti-Goat IgG/Cy7  Cy7标记的小鼠抗羊IgG

整合素αMElisa试剂盒凋亡关联酪氨激酶抗原Mouse Anti-Goat IgG/Cy5.5  Cy5.5标记的小鼠抗羊IgG