K562/Adr细胞

产品名称：白血病阿霉素耐药株
生长特性：悬浮生长

培养条件：RPMI-1640

传代方法：1：2传代

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冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入���存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台；

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

2,3-二吲哚 97%bFGF-9 ELISA Kit  大鼠碱性成纤维生长因子9豚鼠微球粒蛋白1(MCRS1)酶联吸附测定试剂盒

5-氟吲哚酮 98%bFGF-4 ELISA Kit  大鼠碱性成纤维生长因子4豚鼠BTG3关联核蛋白(BANP)酶联吸附测定试剂盒

7-氟吲哚 98%bFGF-6 ELISA Kit  大鼠碱性成纤维生长因子6豚鼠骺蛋白聚糖(EPYC)酶联吸附测定试剂盒  

6-氟吲哚 98%aFGF-1 ELISA Kit  大鼠性成纤维生长因子1豚鼠抑瘤素M受体(OSMR)酶联吸附测定试剂盒

5-氟吲哚 98%FASL ELISA Kit   大鼠凋亡相关因子配体豚鼠胱天蛋白酶4(CASP4)酶联吸附测定试剂盒

4-氟吲哚 98%FAS/CD95 ELISA Kit  大鼠凋亡相关因子豚鼠DNA结合蛋白(DBP)酶联吸附测定试剂盒

吲哚-7-羧 97%EPO ELISA Kit   大鼠红**素豚鼠转录激活因子-5(ATF-5)酶联吸附测定试剂盒

吲哚-5-羧 98%EPOR ELISA Kit  大鼠红**素受体豚鼠肝配蛋白A受体1 (EPHA1)酶联吸附测定试剂盒

(RS)-1H-吲哚-2-羧 97%Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit   大鼠嗜粒趋化蛋白Eotaxin 1豚鼠白介素18(IL-18)酶联吸附测定试剂盒

二氢吲哚 99%ECF ELISA Kit  大鼠嗜粒趋化因子豚鼠神经激肽B(NKB)酶联吸附测定试剂盒

吲哚 CP，>98.5% (GC)EG-VEGF ELISA Kit  大鼠内腺来源的血管内皮生长因子豚鼠结缔组织活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)酶联吸附测定试剂盒  

异喹啉羧 98%1,3- BetaD-Glu ELISA Kit  大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶豚鼠无孢蛋白(ASPN)酶联吸附测定试剂盒

1--3-吲哚 97%CD30 ELISA Kit  大鼠CD30分子豚鼠TATA框结合蛋白相关因子13(TAF13)酶联吸附测定试剂盒

2-吲哚啉 99%E-Cad ELISA Kit  大鼠E钙黏蛋白/上皮钙黏蛋白豚鼠血管内皮生长因子受体1(VEGFR1/Flt1)酶联吸附测定试剂盒

吲哚-3-羧酯 99%BTC ELISA Kit   大鼠β素豚鼠蛋白酶3(PR3)酶联吸附测定试剂盒
K562/Adr细胞肠激酶Elisa试剂盒软骨寡聚质蛋白抗原Mouse Anti-Bov IgG/AP  碱性酶（AP）标记的小鼠抗牛IgG

氧化低密度脂蛋白-β2 GPⅠElisa试剂盒天冬氨-胱氨特异性蛋白酶家族（抗原）Mouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记的小鼠抗牛IgG

αL艾杜糖苷酶Elisa试剂盒半胱蛋白酶蛋白-3（抗原）Mouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的小鼠抗牛IgG

膜联蛋白-A5Elisa试剂盒半胱蛋白酶蛋白-6（抗原）Mouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的小鼠抗牛IgG

庚型肝炎病IgM抗体Elisa试剂盒白介素1-β转化酶样凋亡蛋白酶6（抗原）Mouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的小鼠抗牛IgG

α-胡萝卜素Elisa试剂盒白介素1-β转化酶样凋亡蛋白酶6（抗原）Mouse Anti-Bov IgG  小鼠抗牛IgG

γ-酚Elisa试剂盒半胱蛋白酶-10（抗原）MOSP/PTPMT1  线粒体蛋白酪氨酶1抗体

δ-酚Elisa试剂盒半胱蛋白酶蛋白-13（抗原）MOS  原癌因丝氨/苏氨蛋白激酶MOS抗体

纤溶酶Elisa试剂盒CD19Morphine(C1F3)  单克隆抗体