PLA-802细胞

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产品名称：恶性横纹肌肉瘤；PLA-802
生长特性：贴壁生长

培养条件：RPMI1640+10%FBS

传代方法：1：2传代
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台； 

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 

氨蝶呤 水合物 USPAFP-L3 ELISA Kit   小鼠小扁豆素结合型胎蛋白/胎蛋白异质体3豚鼠补体成分5(C5)酶联吸附测定试剂盒

6-巯嘌呤 99.5%AFP-L2 ELISA Kit   小鼠小扁豆素结合型胎蛋白/胎蛋白异质体2豚鼠糖链抗原153(CA153)酶联吸附测定试剂盒

6-巯嘌呤 98%AFP-L1 ELISA Kit   小鼠小扁豆素结合型胎蛋白/胎蛋白异质体1豚鼠线粒体肌激酶1B(CKMT1B)酶联吸附测定试剂盒  

磺嘧啶银 98%MHB ELISA Kit   小鼠高铁血红蛋白豚鼠热休克蛋白60(HSP-60/HSPD1)酶联吸附测定试剂盒

分析标准品，C:71.09%,H:6.71%,N:10.36%CTX-2 ELISA Kit   小鼠骨退化特异标志物豚鼠内皮抑制素(ES)酶联吸附测定试剂盒

铝标准溶液 100µg/mL，体:5%HClCTX- I ELISA Kit  小鼠Ⅰ型胶原C端肽豚鼠B瘤因子2(Bcl-2)酶联吸附测定试剂盒

锑标准溶液 100mg/L(20°C)，体: 20%HClOMgp-Ab ELISA Kit   小鼠少突胶质髓鞘糖蛋白抗体豚鼠转化生长因子β3(TGF-β3)酶联吸附测定试剂盒

苋菜红标准溶液0.5mg/ml,溶剂:水MUC5B ELISA Kit   小鼠粘蛋白/粘液素5B豚鼠鸟氨氨酰转移酶(OCT)酶联吸附测定试剂盒

草标准溶液 549mg/L，体：PACAP ELISA Kit   小鼠垂体腺苷环化酶激活肽豚鼠催素(PRL)酶联吸附测定试剂盒

砷标准溶液 100µg/mL，体：1%HNO3ssDNA ELISA Kit   小鼠抗单链DNA抗体/变性DNA抗体豚鼠脂质运载蛋白1(LCN1)酶联吸附测定试剂盒

砷标准溶液 0.500μg/g，体：0.2%(v/v)H2SO4，K+2.2mg/L，Na+2PS ELISA Kit   小鼠脂酰丝氨豚鼠促胰液素/素受体(SCTR)酶联吸附测定试剂盒

烯标准溶液 1.01mg/ml，体：纯水PC/CPG ELISA Kit   小鼠胆碱甘油酯豚鼠生长因子受体结合蛋白7(Grb7)酶联吸附测定试剂盒

阿特拉津 分析标准品,99.9%I CTP ELISA Kit  小鼠Ⅰ型胶原交联羧末端肽豚鼠Corin蛋白(CRN)酶联吸附测定试剂盒

敌灵标准溶液1.00mg/ml,溶剂:乙Mouse Anti-nuclear Antibody,ANA ELISA Kit  小鼠抗核抗体豚鼠白三烯A4水解酶(LTA4H)酶联吸附测定试剂盒

双脒 分析标准品，99.9%KLH ELISA Kit   小鼠钥孔虫戚血蓝蛋白豚鼠黑色素瘤相关抗原(MAGE)酶联吸附测定试剂盒
PLA-802细胞寨卡病Elisa试剂盒血管位蛋白样2/血管**素样蛋白-2（多肽）Mitochondrial Pyruvate dehydrogenase kinase 1  酮脱氢酶激酶1抗体

泛素特异性肽酶13Elisa试剂盒胰高血糖素样肽-2（多肽抗原）MITF  MITF相关转录因子抗体

含IQ元GTP酶激活蛋白3Elisa试剂盒94kDa 糖调节蛋白（抗原）MIS12  染色体及有丝分裂蛋白MIS12抗体

维生素B3Elisa试剂盒膜粘连蛋白 A抗原MIRK/Dyrk1B  双特异性酪氨化调节激酶1B

维生素B7Elisa试剂盒G蛋白（鸟苷结合蛋白）（抗原）MIP4/CCL18  巨噬炎症蛋白18抗体

钙粘蛋白Elisa试剂盒糖皮质受体 多肽MIP2/GRO Beta/CXCL2  巨噬炎症蛋白2（ GRＯβ）抗体

凝血因子VaElisa试剂盒膜粘连蛋白-2抗原MIP-1 Beta/CCL4  巨噬炎症因子1β 抗体 MIP-1β

凝血因子ⅧaElisa试剂盒G蛋白偶联受体-2(抗原)MIP-1 Alpha  巨噬炎症因子1α抗体 MIP-1α

顺乌头酶Elisa试剂盒三鸟苷环水解酶（抗原）Mimitin  MYC诱导线粒体蛋白抗体