HuUVECs-11细胞

产品名称：脐静脉内皮细胞；HuUVECs-11

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冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台；

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

铬标准溶液 100µg/mL，体：水MECF(ouse eosinophil chemotactic factor) ELISA Kit  小鼠嗜粒趋化因子豚鼠肌营养**蛋白关联糖蛋白1(DAG1)酶联吸附测定试剂盒

屈标准溶液 3.58μg/mL，体：Eotaxin 1/CCL11(Mouse Eotaxin 1) ELISA Kit  小鼠嗜粒趋化蛋白豚鼠凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)酶联吸附测定试剂盒

对硝标准溶液 1.02mg/ml，体：E-Selectin/CD62E(Mouse E-Selectin) ELISA kit  小鼠E选择素豚鼠酮脱氢酶酶(PDP)酶联吸附测定试剂盒

 分析标准品，>99.5%(HPLC)FAS/CD95(Mouse Factor-related Apoptosis) ELISA Kit  小鼠凋亡相关因子豚鼠前动力蛋白受体1(PKR1)酶联吸附测定试剂盒

菊酯 分析标准品，99.7%Mouse Slit2 ELISA Kit   小鼠Slit2豚鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)酶联吸附测定试剂盒

百清 分析标准品，99.8%A Beta1-42(Mouse amyloid beta peptide 1-42) ELISA Kit  小鼠β淀粉样蛋白1-42豚鼠碳酐酶II(CA2)酶联吸附测定试剂盒

三标准溶液 体：8-OHdG(Mouse 8-Hydroxy-desoxyguanosine) ELISA Kit  小鼠8羟脱氧鸟苷豚鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)酶联吸附测定试剂盒

对标准溶液 用于水分析，1000ug/ml的溶液IL1Ra(Mouse Interleukin 1 receptor antagonist) ELISA kit  小鼠白介素1受体拮抗剂豚鼠斑型POZ蛋白(SPOP)酶联吸附测定试剂盒

盐克仑特罗 98%,分析标准品（剧品）PCT(Mouse Procalcitonin) ELISA Kit  小鼠降钙素原豚鼠白介素24 (IL-24)酶联吸附测定试剂盒

盐克仑特罗 分析标准品，99.1%（剧品）IAA(Mouse insulin autoantibodies) ELISA Kit  小鼠胰岛素自身抗体豚鼠状腺球蛋白(TG)酶联吸附测定试剂盒

杀芬农药溶液10.0μg/g，溶剂：异辛烷（剧品）GP210(Mouse Anti-glucoprotein 210)ELISA Kit  小鼠抗核膜糖蛋白210抗体豚鼠Rac-GTP酶激活蛋白1(Rac-GAP1)酶联吸附测定试剂盒

丁硫溶液1.00mg/ml,溶剂:IL-7(Mouse Interleukin-7) ELISA kit  小鼠白介素7豚鼠性白蛋白酶抑制因子(SLPI)酶联吸附测定试剂盒

死蜱 分析标准品，99.2%MT(Mouse Melatonin) ELISA Kit  小鼠褪黑素豚鼠水通道蛋白3(AQP-3)酶联吸附测定试剂盒

丹农药溶液分析标准品,体:异辛烷Apo-H(Mouse Apolipoprotein H) ELISA Kit  小鼠载脂蛋白H豚鼠周期素依赖性激酶5(CDK5)酶联吸附测定试剂盒

钙标准溶液 1000ug/mL，体:5%HCIHSF1(Mouse Heat Shock Factor 1) ELISA Kit  小鼠热休克因子1豚鼠质金属蛋白酶3(MMP-3)酶联吸附测定试剂盒
HuUVECs-11细胞核仁蛋白14Elisa试剂盒水通道蛋白-3抗原MFGE8/BA46  上皮抗原BA46抗体

Ki-67蛋白Elisa试剂盒胰岛素受体底物-2（抗原）MFF  线粒体裂变因子MFF抗体

Ⅲ型胶原α1Elisa试剂盒水通道蛋白-1抗原MFAP3L  微丝相关蛋白3样抗体

生物素Elisa试剂盒胰岛素受体底物-3（抗原）MFAP1  微原纤维胶原相关蛋白1抗体

转铁蛋白受体1Elisa试剂盒胰岛素受体底物-4（抗原）METTL11A  化样蛋白11抗体（N端）

丝虫抗体IGgElisa试剂盒Metronidazole(1C2)  硝唑单克隆抗体

成纤维生长因子18Elisa试剂盒前列腺素E2抗原Metronidazole  硝唑抗体

表面原性蛋白Elisa试剂盒整合素-β3（抗原）Methionine adenosyltransferase  蛋氨腺苷转移酶抗体

正五聚蛋白2Elisa试剂盒水通道蛋白-9抗原 (多肽抗原)Metallothionein 3  金属硫蛋白3抗体