SKOV3细胞

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产品名称：卵巢癌细胞；SKOV3
形态特性：上皮样

生长特性：贴壁生长

特征特性：SK-OV-3由G.Trempe和L.J.Old在1973年从卵巢肿瘤病人的腹水分离得到此细胞对肿瘤坏死因子和几种细胞毒性包括白喉、顺铂和阿霉素均耐受。在裸鼠中致瘤，且形成与卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。

培养条件：DMEM(高糖）+10%FBS

传代方法：消化CQ-5分钟，1:2,3天内可长满
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台； 

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 

乙二四乙二钠标准溶液0.05 M,溶剂:水SCF/MGF(Mouse Stem cell factor/mast cell growth factor) ELISA kit  小鼠干因子/肥大生长因子豚鼠8-异构前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)酶联吸附测定试剂盒

吸收峰波长(nm)：400.0～620.0，体：酶标分析仪SDF-1 Beta/CXCL12(Mouse Stromal cell derived factor 1 Beta) ELISA kit  小鼠质衍生因子1β豚鼠性T相关抗原4(CTLA4)酶联吸附测定试剂盒  

吸光度：0.200～1.000A， 体: 酶标分析仪 TGF- Beta1(Mouse Transforming Growth factor Beta1) ELISA kit  小鼠转化生长因子β1豚鼠三肽肽酶I(TPP1)酶联吸附测定试剂盒

乙标准溶液 0.80mg/mL，体：水TNFsR- I (Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor I ) ELISA KIT  小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ豚鼠TATA框结合蛋白相关因子1(TAF1)酶联吸附测定试剂盒

铕标准溶液 1000µg/mL in 10%HCLTNFsR- II (Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor II ) ELISA KIT  小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ豚鼠纤溶酶-抗纤溶酶复合物(PAP)酶联吸附测定试剂盒

乙二四乙(EDTA)二钠纯度标准物质 99.96%TNF- Alpha(Mouse Tumor necrosis factor Alpha) ELISA KIT  小鼠肿瘤坏死因子α豚鼠神经营养因子3(NT-3)酶联吸附测定试剂盒

乙汞标准溶液 75.3×10-6TNF- Beta(Mouse Tumor necrosis factor Beta) ELISA KIT  小鼠肿瘤坏死因子β豚鼠血管**素样蛋白2(ANGPTL2)酶联吸附测定试剂盒  

环氧烷标准溶液 997.8mg/L,溶剂:二Col IV (Mouse Collagen Type IV ) ELISA KIT  小鼠Ⅳ型胶原豚鼠肿瘤坏死因子受体超家族成员1B(TNFRSF1B)酶联吸附测定试剂盒

柠檬黄标准溶液0.50mg/mL，溶剂：水HK(Mouse Hexokinase) ELISA KIT  小鼠己糖激酶豚鼠中性粒碱性酶(NAP)酶联吸附测定试剂盒

荧蒽标准溶液 10～100μg/mL，体：PDH E1(Mouse pyruvate dehydrogenase-E1) ELISA KIT  小鼠酮脱氢酶E1豚鼠可溶性间粘附分子1(sICAM-1)酶联吸附测定试剂盒

吡氟禾草灵标准溶液 0.101mg/mlPGE2 ELISA Kit(mouse)  小鼠前列腺素E2豚鼠颗粒体蛋白(GRN)酶联吸附测定试剂盒

氟硅唑标准溶液 1.00mg/mlGSK(Mouse glycogen synthase kinase) ELISA KIT  小鼠糖原合成酶激酶豚鼠葡萄糖6异构酶(GPI)酶联吸附测定试剂盒  

仲丁威标准溶液 1.00mg/mlCXCL16(Mouse CXC-chemokine ligand 16) ELISA KIT  小鼠CXC趋化因子配体16豚鼠乙脱氢酶1(ADH1)酶联吸附测定试剂盒

氟标准溶液 1.00μg/g，体:0.01mol/LH3BO3u-T3(Mouse Ultrasensitivity Tri-iodothyronine) ELISA KIT  小鼠高敏状腺原氨豚鼠鸟苷激酶1(GUK1)酶联吸附测定试剂盒

标准溶液 10.8mg/ml，体：纯水Bcl-2(Mouse B-cell leukemia/lymphoma 2) ELISA KIT  小鼠B瘤因子2豚鼠瘦素受体(LEPR)酶联吸附测定试剂盒
SKOV3细胞泛素Elisa试剂盒一氧化氮合成酶-3（抗原）MCM5  微小染色体维持缺陷蛋白5抗体

钙调酶Elisa试剂盒神经肽 Y（抗原）MCM3  微小染色体维持缺陷蛋白3抗体

钙调素Elisa试剂盒谷氨受体（抗原）MCM2  微小染色体维持缺陷蛋白2抗体

谷氨合成酶Elisa试剂盒神经生长因子-3（抗原）Mcl1/BCL2L3  髓样分化蛋白2抗体

谷氨脱氢酶Elisa试剂盒神经生长因子4/5（抗原）MCKD2/UMOD  尿调节蛋白抗体

谷氨酰合成酶Elisa试剂盒神经生长因子（抗原）MCKD2/UMOD  尿调节蛋白抗体

谷胱甘肽还原酶Elisa试剂盒Bcl-xL蛋白抗原MCK10/CD167a/DDR1  神经上皮酪氨激酶抗体（癌激酶10）

果胶果酯酶Elisa试剂盒化(Ser62)Bcl-xL蛋白抗原MCHR/GPR24  G蛋白偶联受体24抗体

果胶酶Elisa试剂盒丁酰胆碱脂酶抗原(N端)MCG10  RNA相关结合蛋白MCG10抗体

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