Caov3细胞

产品名称：卵巢癌细胞；Caov3
形态特性：上皮样

生长特性：贴壁生长

特征特性：该细胞1976年建系，源自一位54岁白人女性的卵巢腺癌组织。

培养条件：DMEM(高糖）+10%FBS

传代方法：1:3传代，2-3天换液一次

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冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台；

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

镁标准溶液 1000µg/mL，体:5%HClAMA(Mouse Anti-myocardial antibody) ELISA Kit  小鼠抗心肌抗体豚鼠IX型胶原α3 (COL9α3)酶联吸附测定试剂盒

异草标准溶液 1.00mg/mlCP/CER(Mouse Ceruloplasmin) ELISA Kit  小鼠铜蓝蛋白豚鼠线粒体超氧化物歧化酶2(SOD2)酶联吸附测定试剂盒

标准溶液 1.00mg/mlp53(Mouse p53/tumor protein) ELISA Kit  小鼠p53豚鼠组织因子途径抑制因子(TFPI)酶联吸附测定试剂盒

标准溶液 1.00mg/ml（剧品）cGMP(Mouse Cyclic guanosine monophosphate) ELISA Kit  小鼠环鸟苷豚鼠纽蛋白(VCL)酶联吸附测定试剂盒

标准溶液 998.0mg/L，体:（剧品）NOS(Mouse nitric oxide synthase) ELISA Kit  小鼠一氧化氮合成酶豚鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR1A)酶联吸附测定试剂盒

杀扑标准溶液 1.02mg/ml（剧品）iNOS(Mouse inducible nitric oxide synthase) ELISA Kit  小鼠诱导型一氧化氮合成酶豚鼠膜联蛋白A2(ANXA2 )酶联吸附测定试剂盒  

汞标准溶液100μg/ml,体:3%硝eNOS(Mouse Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit  小鼠内皮型一氧化氮合成酶豚鼠补体1q(C1q)酶联吸附测定试剂盒

汞标准溶液10.0ng/g，体: 0.4mol/L HCL，K+2.2mg/L，Na+23mg/LHIS(Mouse Histamine) ELISA Kit  小鼠组豚鼠赖氨酰氧化酶样蛋白4(LOXL4)酶联吸附测定试剂盒

钼标准溶液 100µg/mL，体: 1%HClLp-PL-A2(Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2) ELISA Kit  小鼠脂蛋白相关脂酶A2豚鼠多巴转运蛋白(DAT)酶联吸附测定试剂盒

硬脂酯标准溶液10.0ng/μl，溶剂：异辛烷HSP-90(Mouse Heat Shock Protein 90) ELISA Kit  小鼠热休克蛋白90豚鼠白球蛋白样受体亚家族B成员4(LILRB4)酶联吸附测定试剂盒

标称峰值波长1：450左右nm，标称峰值波长2：550左右nm，标称峰值HSP-70(Mouse Heat Shock Protein 70) ELISA Kit  小鼠热休克蛋白70豚鼠溶酶(LZM)酶联吸附测定试剂盒

对硫-无水乙溶液 1.00～1.00×10³µg/mADP(Mouse adiponectin) ELISA Kit  小鼠脂联素豚鼠趋化素样因子超家族成员7(CKLFSF7)酶联吸附测定试剂盒

汞标准溶液1000μg/ml,体:3%硝Hsp-40(Mouse Heat Shock Protein 40) ELISA Kit  小鼠热休克蛋白40豚鼠肝配蛋白A受体3 (EPHA3)酶联吸附测定试剂盒

水中镉、铬、铜、镍、铅、锌混标体: 0.5mol/L HNO3，K+2.2mg/LA Beta1-40(Mouse amyloid beta peptide 1-40) ELISA Kit  小鼠β淀粉样蛋白豚鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)酶联吸附测定试剂盒

禾草敌标准溶液1.00mg/ml,溶剂:IL-8/CXCL8(Mouse interleukin 8) ELISA Kit  小鼠白介素8豚鼠纤溶酶原(PLG)酶联吸附测定试剂盒
Caov3细胞烯式酮羧激酶Elisa试剂盒D型-过氧化酶活化增生受体(多肽）MARCH9  膜相关环指蛋白9抗体

脂Elisa试剂盒蛋白质酶-2A（抗原）MARCH8  膜相关环指蛋白8抗体

绿色荧光蛋白Elisa试剂盒B特异性转录因子抗原MARCH7/Axotrophin  膜相关环指蛋白7抗体

Elisa试剂盒蛋白酯酶-2B 催化亚单位（抗原）MARCH6  膜相关环指蛋白6抗体

酯Elisa试剂盒孕受体（抗原）MARCH5  膜相关环指蛋白5抗体

木质素Elisa试剂盒早老素蛋白-1（抗原）MARCH4  膜相关环指蛋白4抗体

尿苷二Elisa试剂盒早老素蛋白-1（S182）MARCH3  膜相关环指蛋白3抗体

脲酶Elisa试剂盒癌易感因1抗原(小鼠 大鼠)MARCH2  膜相关环指蛋白2抗体

柠檬合酶Elisa试剂盒癌易感因1抗原MARCH11  膜相关环指蛋白11抗体

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