Farage细胞

产品名称：
形态特性：母细胞样

生长特性：悬浮生长

特征特性：Farage细胞源于一名患有弥漫性大B细胞瘤(DLBCL）白人女性的活检组织，由HBen-Bassat建系。经IL-4处理，该细胞CD21,CD22,CD54和CD58表达上调，而CD21,CD22,andCD38表达下调。

培养条件：RPMI1640+10%FBS

传代方法：1:3传代,2-3天传一代

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冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台；

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

闭口闪点标准物质 116.8℃ACA-IgG(Mouse anti-cardiolipin antibody IgG) ELISA Kit  小鼠抗心脂抗体IgG豚鼠重肽铁蛋白(FTH)酶联吸附测定试剂盒

开口闪点标准物质 165.8℃AP12(Mouse apelin 12) ELISA Kit  小鼠apelin 12豚鼠肠三叶肽因子3(TFF3)酶联吸附测定试剂盒

开口闪点标准物质 221.2℃IFN- Alpha(Mouse Interferon Alpha) ELISA Kit  小鼠α干扰素豚鼠触珠蛋白相关蛋白(HPR)酶联吸附测定试剂盒

Ⅲ 分析标准品，≥96.0% (HPLC)，用于食品分析Mouse rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit  小鼠的牛血清白蛋白残留检测豚鼠前列腺素E受体2(EP2)酶联吸附测定试剂盒

山梨标准溶液 1.00mg/mL，体：纯水CA724(Mouse CA724) ELISA Kit  小鼠肿瘤标志物豚鼠粘蛋白5AC(MUC5AC)酶联吸附测定试剂盒

7B 95%F II (Mouse coagulation factor II ) ELISA Kit  小鼠凝血因子Ⅱ豚鼠酮脱氢酶β(PDHβ)酶联吸附测定试剂盒

二氧化硅标准溶液 100mg/L，体:0.05%Na2CO3ET(Mouse endotoxin) ELISA Kit  小鼠内素豚鼠白介素13(IL-13)酶联吸附测定试剂盒

钠标准溶液 1000µg/mL，体:1%HClANP(Mouse Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit  小鼠心钠肽豚鼠脂多糖结合蛋白(LBP)酶联吸附测定试剂盒

钠标准溶液 100µg/mL，体:1%HClPPAR- Gamma(Mouse Peroxisome Proliferator-activated receptor Gamma) ELISA Kit  小鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ豚鼠状腺素抗体(TAb)酶联吸附测定试剂盒

日落黄标准溶液0.500mg/ml,溶剂:水TSST-1(Mouse toxic shock syndrome toxin) ELISA Kit  小鼠性休克综合征素1豚鼠周期素D1(CCND1)酶联吸附测定试剂盒

乙烯标准溶液0.88mg/ml，溶剂:CsA(Mouse Cyclosporine A) ELISA Kit  小鼠环孢素A豚鼠瘦素(LEP)酶联吸附测定试剂盒

氟化钠 分析标准品，99.93%C1INH(Mouse Complement 1 inhibitor autoantibody) ELISA Kit  小鼠补体1抑制物抗体豚鼠晶体蛋白(CLC)酶联吸附测定试剂盒

草钠 分析标准品，99.96%PABA(Mouse para-aminobenzoic acid) ELISA Kit  小鼠对氨豚鼠趋化因子CC受体样蛋白1(CCRL1)酶联吸附测定试剂盒

硫标准溶液 1000ug/ml，体:1%HClhs-CRP(Mouse high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit  小鼠超敏C反应蛋白豚鼠信号素4C (SEMA4C)酶联吸附测定试剂盒

糖精钠标准溶液 1.00mg/mL，体：纯水Beta2-GP1 IgA/G/M(Mouse Beta2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M) ELISA Kit  小鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M豚鼠轴蛋白抑制蛋白2(AXIN2)酶联吸附测定试剂盒
Farage细胞异柠檬脱氢酶Elisa试剂盒神经生长因子的一种（抗原）MAGEB3  黑色素瘤相关抗原B3抗体

异戊烯腺嘌呤Elisa试剂盒活化半胱蛋白酶蛋白-3抗原MAGEB2  黑色素瘤相关抗原B2抗体

吲哚-3丁Elisa试剂盒重组谷胱甘肽转移酶GST标签蛋白MAGEB1  黑色素瘤相关抗原B1抗体

吲哚Elisa试剂盒半胱蛋白酶蛋白-4抗原MAGEA5  黑色素瘤相关抗原5抗体

吲哚乙Elisa试剂盒神经生长因子受体的一种（抗原）MAGE-A4  黑色素瘤相关抗原4抗体

吲哚乙氧化酶Elisa试剂盒重组生长分化因子8/肌肉抑制素MAGEA2  黑色素瘤相关抗原2抗体

油菜素内酯Elisa试剂盒神经生长因子受体的一种（抗原）MAGEA12  黑色素瘤相关抗原12抗体

油菜素甾Elisa试剂盒神经生长因子受体的一种（抗原）MAGEA11  黑色素瘤相关抗原11抗体

游离氨Elisa试剂盒促状腺素受体（抗原）MAGEA11  黑色素瘤相关抗原11抗体

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