MOLT-4细胞

产品名称：
形态特性：母细胞样；圆形

生长特性：悬浮生长

特征特性：MOLT-4与MOLT-3来源于一名19岁的男性急性细胞性白血病的复发患者，该患者前期接受过多种联合化疗。MOLT-4细胞系为T细胞起源，p53基因的第248位密码子有一个G→A突变，不表达p53，不表达球蛋白或EB病毒；可产生高水平的末端脱氧核糖转移酶；表达CD1(49%),CD2(35%),CD3A(26%)B(33%)C(34%),CD4(55%),CD5(72%),CD6(22%),CD7(77%)。

培养条件：RPMI1640+10%FBS

传代方法：1：2传代

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冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台；

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

锌标准溶液1000ug/mL,体:1%硝Gelsolin(Mouse Gelsolin ) ELISA Kit  小鼠凝溶胶蛋白豚鼠G蛋白信号调节蛋白4(RGS4)酶联吸附测定试剂盒

化锌标准溶液 0.1000mol/LRANKL(Mouse receptor activator of nuclear factor kappa B ligand) ELISA Kit  小鼠核因子κB受体活化因子配豚鼠原钙黏素γA2(PCDHγA2)酶联吸附测定试剂盒

烃二 95%TpP(Mouse thrombus precursor protein) ELISA Kit  小鼠血栓前体蛋白豚鼠蛋白酪氨酶受体O(PTPRO)酶联吸附测定试剂盒

烃二 药用级,95.0-105.0%GnRH(Mouse gonadotropin-releasing hormone) ELISA Kit  小鼠促性腺释放豚鼠血管活性肠肽(VIP)酶联吸附测定试剂盒

邻二二酯 Standard for GC，≥99.7% (GC)INH-BGnRH(Mouse inhibin B) ELISA Kit  小鼠抑制素B豚鼠性酶1(ACP1)酶联吸附测定试剂盒

邻二二酯 CP,99%TRH(Mouse thyrotropin-releasing hormone) ELISA Kit  小鼠促状腺素释放豚鼠Fas凋亡抑制分子3(FAIM3)酶联吸附测定试剂盒

邻二二酯 99%CRH(Mouse corticotropin releasing hormone) ELISA Kit  小鼠促肾上皮质释放豚鼠丝裂原激活蛋白激酶激酶6(MAP2K6/MKK6)酶联吸附测定试剂盒

邻二二酯 色谱固定液ISR- Beta(Mouse Insulin Receptor Beta) ELISA Kit  小鼠胰岛素受体β豚鼠蛋白聚糖(PG)酶联吸附测定试剂盒

邻二二酯标准溶液 1000μg/ml，溶剂：A1c(Mouse Glycated hemoglobin A1c) ELISA Kit  小鼠糖化血红蛋白A1c豚鼠软骨糖蛋白39(GP39)酶联吸附测定试剂盒

邻二二酯标准溶液5000μg/ml，溶剂：LFA-3/CD58(Mouse lymphocyte function associated antigen 3) ELISA Kit  小鼠功能相关抗原3豚鼠肌球蛋白重链1(MYH1)酶联吸附测定试剂盒

邻二二酯 分析标准品sPECAM-1/sCD31(Mouse soluble plaet endothelial cell adhesion molecule 1) ELISA Kit  小鼠可溶性血小板内皮粘附分子1豚鼠碳酐酶VB(CA5B)酶联吸附测定试剂盒

邻二二乙酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)BMP-7(Mouse Bone morphogenetic protein 7) ELISA Kit  小鼠骨成型蛋白7豚鼠分裂周期蛋白23(CDC23)酶联吸附测定试剂盒

邻二二乙酯 AR,99.5%HA(Mouse Hyaluronic acid) ELISA Kit  小鼠透明质豚鼠卵泡受体(FSHR)酶联吸附测定试剂盒

邻二二乙酯 CP,99.0%GLP-1HA(Mouse ghcagons-like pepfide 1) ELISA Kit  小鼠胰高血糖素样肽1豚鼠谷胱甘肽S转移酶μ2(GSTμ2/GSTm2)酶联吸附测定试剂盒

邻二二乙酯 分析标准品CCK(Mouse Cholecystokinin) ELISA Kit  小鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽豚鼠肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)酶联吸附测定试剂盒
MOLT-4细胞脂多糖Elisa试剂盒白分化抗原CD2APLRRC62  富含亮氨重复蛋白62抗体

β葡聚糖Elisa试剂盒CD33抗原(大、小鼠）LRRC59  LRRC59蛋白抗体

二核酮糖羧化酶Elisa试剂盒CD34抗原（表面的唾液粘蛋白）LRRC4B/NGL3  神经突触蛋白NGL3抗体

酮羧化酶Elisa试剂盒CD38多肽（小鼠、大鼠）LRRC41  LRRC41蛋白抗体

球蛋白Elisa试剂盒CD38抗原（人）LRRC4  脑瘤相关因抗体

花叶病Elisa试剂盒CD36（多肽）LRRC2  LRRC2蛋白抗体

壁降解酶Elisa试剂盒CD7抗原LRRC15  富含亮氨重复蛋白15抗体

色素Elisa试剂盒CD40L抗原LRRC10  富含亮氨重复蛋白10抗体

半纤维素酶Elisa试剂盒CD44抗原 (多肽抗原)LRPAP1/MRAP  脂蛋白受体相关蛋白抗体（低密度脂蛋白相关蛋白的相关蛋白1）