实验材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个，细胞培养瓶1个
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块；
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；
8、酒精灯1台；
|
产品名称
|
规格
|
货号
|
|
HLEC细胞
|
T25
|
FS-X3345
|
产品名称：
培养条件：内皮细胞培养基，scienCA-ll，货号：1001
公司细胞现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
冻存培养基：
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
灭多威 分析标准品，99.9%HD(Mouse Histone Deacetylase)ELISA Kit 小鼠组织蛋白去乙酰化酶豚鼠脂酶D2(PLD2)酶联吸附测定试剂盒
1,1,2-三乙烷标准溶液 1.09mg/ml，体：E3(Mouse Estriol)ELISA Kit 小鼠雌三豚鼠多聚球蛋白受体(PIGR/SC)酶联吸附测定试剂盒
标准溶液 1000μg/ml，溶剂：ASD(Mouse Androstenedione)ELISA Kit 小鼠雄烯二酮豚鼠V-Myc骨髓瘤病癌因同源物(MYC)酶联吸附测定试剂盒
标准溶液0.99mg/ml,溶剂:F-TESTO(Mouse Free Testoterone)ELISA Kit 小鼠游离睾酮豚鼠外生骨疣蛋白1(EXT1)酶联吸附测定试剂盒
2,4,6-三硝标准溶液0.99mg/ml,溶剂:T(Mouse Testoterone)ELISA Kit 小鼠睾酮豚鼠褪黑素(MT)酶联吸附测定试剂盒
锡标准溶液 100μg/mL，体: 10%HClPROG(Mouse Progesterone)ELISA Kit 小鼠孕/孕酮豚鼠肌球蛋白轻链激酶(MLCK/MYLK)酶联吸附测定试剂盒
碲标准溶液 100μg/ml，体:HCIsRANKL(Mouse soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand)ELISA Kit 小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配豚鼠原纤维蛋白3(FBN3)酶联吸附测定试剂盒
1000µg/mL，体:10%HClCT(Mouse Calcitonin)ELISA Kit 小鼠降钙素豚鼠胞浆型脂酶A2(cPLA2)酶联吸附测定试剂盒
铥标准溶液 1000μg/mL，体：10%HCLET-1(Mouse Endothelin 1)ELISA Kit 小鼠内皮素1豚鼠前列腺素内过氧化物合酶1(PTGS1)酶联吸附测定试剂盒
1,2,5-三标准溶液0.099mg/ml,溶剂:异辛烷E2(Mouse Estradiol)ELISA Kit 小鼠雌二豚鼠15脂加氧酶(15-LO)酶联吸附测定试剂盒
总碱度溶液标准物质 1000μg/mL，体:水Cortisol(Mouse Cortisol)ELISA Kit 小鼠皮质豚鼠松弛素/胰岛素样肽受体1(RXFP1)酶联吸附测定试剂盒
三：5.00mg/L，四化碳：0.20mg/L，体：TSH(Mouse Thyroid Stimulating Hormone)ELISA Kit 小鼠促状腺素豚鼠微管关联蛋白(MAPτ)酶联吸附测定试剂盒
氩-氩法地质年龄标准物质(角闪石) 体:角闪石Methylase(Mouse Methylase)ELISA Kit 小鼠化酶豚鼠髓样前体抑制因子2(MPIF2)酶联吸附测定试剂盒
尿素氮溶液标准物质 尿素氮:1000.4 mg/LPCNA(Mouse proliferating cell nuclear antigen antibody)ELISA Kit 小鼠抗增殖核抗原抗体豚鼠烟酰腺嘌呤二核苷(NADPH)酶联吸附测定试剂盒
蚜灭标准溶液 0.100mg/mlLPL(Mouse lipoprotein lipase)ELISA Kit 小鼠脂蛋白脂酶豚鼠肝脏/红酮激酶(PK)酶联吸附测定试剂盒
HLEC细胞软脂Elisa试剂盒CC趋化因子受体3抗原Ly-6G/Gr-1 抗原6G抗体
油Elisa试剂盒表面趋化因子受体2A抗原LXR alpha 肝脏X受体抗体
超氧阴离子自由Elisa试剂盒表面趋化因子受体4抗原Lxn/Latexin 羧肽酶抑制剂抗体
氧化酶Elisa试剂盒表面趋化因子受体6抗原Lumican 膜聚糖蛋白抗体
硫盐Elisa试剂盒表面趋化因子受体6抗原Luciferase 荧光素酶抗体
半胱氨蛋白酶Elisa试剂盒CC趋化因子受体7（多肽）Lubricin/SZP 浅表层粘膜蛋白多糖抗体
抗素Elisa试剂盒CXCL10趋化因子10/干扰素诱导蛋白10抗原LTBP4 转化生长因子β结合蛋白4抗体
白介素1αElisa试剂盒血管内皮生长因子（多肽抗原）LTB4-R2 白三烯B4受体2抗体
谷胱甘肽疏转移酶Elisa试剂盒CD10抗原LTB4-R1/BLTR 白三烯B4受体1抗体
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
- 温馨提示：为规避购买风险，建议您在购买前务必确认供应商资质与产品质量。
- 免责申明：以上内容为注册会员自行发布，若信息的真实性、合法性存在争议，平台将会监督协助处理，欢迎举报