实验材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个;
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个,细胞培养瓶1个
5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块;
7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;
8、酒精灯1台;
产品名称
|
规格
|
货号
|
BALL-1细胞
|
T25
|
FS-X3351
|
形态特性:母细胞
生长特性:悬浮生长
特征特性:该细胞系来源于一典型的人B细胞白血病病人。
培养条件:RPMI1640+10%FBS
传代方法:1:2传代
公司细胞现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
冻存培养基:
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻���培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案:
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
1,6-二溴己烷 97%LF/LTF (Rabbit Lactoferrin) ELISA Kit 兔铁传递蛋白/铁蛋白豚鼠生长分化因子9(GDF9)酶联吸附测定试剂盒
内消旋-2,3-二巯丁二 98%c (Rabbit cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit 兔心肌特异性肌钙蛋白T豚鼠凝血因子ⅩⅢ(F13)酶联吸附测定试剂盒
1,3-二烷 98%LZM (Rabbit Lysozyme) ELISA Kit 兔溶酶豚鼠半胱氨酰白三烯受体1(CYSLTR1)酶联吸附测定试剂盒
异辛硫 97%PRL (Rabbit prolactin) ELISA Kit 兔子催素豚鼠甘露糖苷酶α1A类成员1(MAN1A1)酶联吸附测定试剂盒
3,4-乙烯二氧噻吩 99%LH (Rabbit luteotropic hormone) ELISA Kit 兔子促黄体豚鼠活化蛋白C(APC)酶联吸附测定试剂盒
溴乙乙酯 98%ABAb (Rabbit anti-brain tissue antibody) ELISA Kit 兔抗脑组织抗体豚鼠血小板球蛋白β(βTG/PBP/CXCL7/NAP2)酶联吸附测定试剂盒
1,2-乙二硫 97%p53 (Rabbit p53/tumor protein) ELISA Kit 兔p53豚鼠丝氨/苏氨激酶39(STK39)酶联吸附测定试剂盒
溴代异辛烷 99%BAX (Rabbit Bcl-2 Assaciated X protein) ELISA Kit 兔Bcl-2相关X蛋白豚鼠肌激酶(CK)酶联吸附测定试剂盒
薄荷酰 98%ADR (Rabbit adramycin) ELISA Kit 兔阿霉素豚鼠前列腺素F(PGF)酶联吸附测定试剂盒
1-己硫 96%MMP-2/Gelatinase A (Rabbit matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA Kit 兔质金属蛋白酶2/明胶酶A豚鼠二氧化酶(DAO)酶联吸附测定试剂盒
正庚硫 98%OSM (Rabbit Oncostatin-M) ELISA Kit 兔抑瘤素M豚鼠血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/KDR)酶联吸附测定试剂盒
1,6-己二硫 97%ANG-2 (Rabbit Angiopoietin 2) ELISA Kit 兔血管**素2豚鼠凝血因子Ⅱ(F2)酶联吸附测定试剂盒
3--1-丁硫 97%ANG- II (Rabbit angiotension II ) ELISA Kit 兔血管紧张素Ⅱ豚鼠蛋白聚糖4(PRG4)酶联吸附测定试剂盒
异丁硫 98%sFAS/Apo-1 (Rabbit soluble Factor-related Apoptosis) ELISA Kit 兔可溶性凋亡相关因子豚鼠抗脂抗体(APA)酶联吸附测定试剂盒
溴乙酯 97%6-keto-PGF1a (Rabbit 6-keto-prostaglandin F1a) ELISA Kit 兔6酮前列腺素F1a豚鼠核糖体蛋白L10(RPL10)酶联吸附测定试剂盒
BALL-1细胞查尔酮合成酶Elisa试剂盒c-erbB-2受体抗原LOX-1/OLR1 凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体抗体
钙依赖蛋白激酶Elisa试剂盒c-erbB-4癌因抗原LONP1 线粒体离子肽酶1抗体
脂肪去饱和酶Elisa试剂盒囊性纤维化跨膜转运调节因子抗原l-Myc Myc因肺癌相关蛋白抗体
叶绿素Elisa试剂盒CG6856-PA抗原LMW Kininogen/Kininogen 1 低分子量生长促进因子抗体(激肽原1)
β-类胡萝卜素Elisa试剂盒嗜铬粒素A抗原LMP7 低分子量蛋白酶体7抗体
叶黄素Elisa试剂盒嗜铬粒素B抗原LMP7 低分子量蛋白7抗体
δ氨乙酰脱水酶Elisa试剂盒蕈碱型乙酰胆碱受体M1抗原LMP2A EB病LMP-2A蛋白抗体
胆色素原脱氨酶Elisa试剂盒蕈碱型乙酰胆碱受体M3抗原LMP2 低分子质量蛋白2抗体
粪卟啉原氧化酶Elisa试剂盒角蛋白18(多肽)LMO4 肿瘤自身抗原LMO4抗体
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。