IMR-32细胞

产品名称：神经母细胞瘤细胞；IMR-32
形态特性：存在两种细胞类型，小的神经母细胞样细胞和大的透明成纤维样细胞

生长特性：贴壁生长

特征特性：该细胞是1967年4月由NicholsWW,LeeJ和DwightS建立，来源于一名13月龄白人男婴腹部肿块，临床诊断为神经母细胞瘤，伴有极少部位的类器官样分化。

培养条件：MEM+10%FBS

传代方法：1：2传代

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冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台；

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

1,5-环辛二烯 99%PLAUR/uPAR (Rabbit Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor) ELISA Kit  兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体豚鼠穿孔蛋白1/成孔蛋白(PRF1/PFP)酶联吸附测定试剂盒

顺,顺-1,5-环辛二烯 99%uPA (Rabbit urokinase plasminogen activator) ELISA Kit  兔尿激酶型纤溶酶原激活物豚鼠生长停滞特异性蛋白6(Gas6)酶联吸附测定试剂盒

环己 AR,98%hs-CRP (Rabbit high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit  兔超敏C反应蛋白豚鼠胰岛素降解酶(IDE)酶联吸附测定试剂盒

邻二二酯 CP,99%MMP-1 (Rabbit matrix metalloproteinase 1) ELISA Kit  兔质金属蛋白酶1豚鼠激酶锚定蛋白1(AKAP1)酶联吸附测定试剂盒

N,N'-二脲 98%8-epi-PGF2 Alpha (Rabbit 8-epi-prostaglandin F2alpha) ELISA Kit  兔8-异构前列腺素豚鼠末端运动神经元生存蛋白1(SMN1)酶联吸附测定试剂盒

邻二二烯酯 CPPF-4/CXCL4 (Rabbit　Plaet Factor 4) ELISA Kit  兔子血小板因子4豚鼠肌肉果糖激酶(PFKM)酶联吸附测定试剂盒

邻二二烯酯 98.0%Beta-TG (Rabbit Beta-Thromboglobulin) ELISA Kit  兔子β血小板球蛋白/β血栓环蛋白豚鼠胃泌素抑制肽(GIP)酶联吸附测定试剂盒  

叔十二硫 98%NE (Rabbit neutrophil elastase) ELISA Kit  兔子中性粒弹性蛋白酶豚鼠波形蛋白(VIM)酶联吸附测定试剂盒

二乙二一己 96%C3a (Rabbit Complement fragment 3a) ELISA Kit  兔子补体片断3a豚鼠成纤维生长因子4(FGF4)酶联吸附测定试剂盒

2-乙-1,3-己二 98%MMP-3 (Rabbit matrix metalloproteinase 3) ELISA Kit  兔子质金属蛋白酶3豚鼠转化生长因子β2(TGF-β2)酶联吸附测定试剂盒

2-乙-1,3-己二 分析标准品TRAP-5b ELISA Kit(Rabbit)  兔酶TRAP-5b ELISA试剂盒豚鼠白分化抗原CD30(CD30)酶联吸附测定试剂盒

乙二叔丁  99%sCD40L (Rabbit differentiation 40 ligand) ELISA Kit  兔子可溶性CD40配体豚鼠多巴受体D5(D5R/DRD5)酶联吸附测定试剂盒

正庚 AR,98.0%MHC I /RLA I (Rabbit major histocompatibility complex I ) ELISA Kit  兔主要组织相容性复合体Ⅰ类豚鼠T特异性鸟苷三酶(Tgtp)酶联吸附测定试剂盒

1,6-己二 CP,98.0%BLAP ELISA Kit(Rabbit)  兔骨碱性酶 ELISA 试剂盒豚鼠甘肽/甘素(GAL)酶联吸附测定试剂盒

1,6-己二 AR,99.0%BGP(Osteocalcin/Bone Gla-protein)ELISA Kit  兔骨钙素 ELISA试剂盒豚鼠多巴受体D3(D3R/DRD3)酶联吸附测定试剂盒
IMR-32细胞乙烯利Elisa试剂盒角蛋白8（多肽）LIR-6  白球蛋白样受体6抗体

三腺苷酶Elisa试剂盒酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗原Lipophilin B  亲脂性蛋白B抗体

几丁质酶Elisa试剂盒钙激活离子通道4抗原LIPK  脂肪酶家庭成员K抗体

木聚糖酶Elisa试剂盒c-mer原癌因酪氨激酶抗原Lipin 1  脂酯酶LPIN1抗体

碳酐酶Elisa试剂盒c-Myc tag标签多肽LIPG/Endothelial lipase  内皮脂肪酶抗体

碳酐酶6Elisa试剂盒AU5 tag标签抗原Lingo-1  Nogo受体反应蛋白抗体

过氧化氢酶Elisa试剂盒AU1 tag标签多肽Lin-28B  RNA结合蛋白LIN28B抗体

脉带花叶病Elisa试剂盒Glu-Glu Tag多肽蛋白Lin28  RNA结合蛋白LIN28抗体

金属硫蛋白Elisa试剂盒环核苷阳离子通道蛋白α2抗原LIMS1  整合素和生长因子样蛋白1抗体

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