产品名称:神经干细胞;mNSCs-11
产品名称
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规格
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货号
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mNSCs-11细胞
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T25
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FS-X3363
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冻存培养基:
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案:
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重���悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
实验材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个;
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个,细胞培养瓶1个
5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块;
7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;
8、酒精灯1台;
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
镝标准溶液 1000μg/mlAnti-Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠、猴、牛化乙酰辅酶A羧化酶抗体IgG豚鼠趋化因子CCL3样蛋白1(CCL3L1)酶联吸附测定试剂盒
铕标准溶液 1000μg/ml Anti-AchE/FITC 荧光素标记乙酰胆碱酶抗体IgG豚鼠蛋白激酶B(PKB)酶联吸附测定试剂盒
铒标准溶液 1000μg/ml,体:1.0 mol/L HNO<sub>3</sub>Anti-CHRNA2/FITC 荧光素标记烟碱型乙酰胆碱受体A2(神经型)抗体IgG豚鼠唾液结合球蛋白样凝集素10(SIGLEC10)酶联吸附测定试剂盒
铒标准溶液 1000μg/mL,体:10%HCLAnti- Beta-Actin/Gold 金标记β-肌动蛋白抗体IgG豚鼠血管内皮生长因子B(VEGF-B)酶联吸附测定试剂盒
铕标准溶液 1000µg/mL in 10%HCLAnti-Acinus L/S/FITC 荧光素标记腺泡Acinus L/S抗体IgG豚鼠STAT蛋白抑制因子1(PIAS1)酶联吸附测定试剂盒
标准溶液 1000μg/mlAnti-Acinus(phospho S1180)/FITC 荧光素标记腺泡化Acinus抗体IgG豚鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)酶联吸附测定试剂盒
氟离子(F-)标准溶液 1000μg/mlAnti-Ack1/FITC 荧光素标记Ack1抗体IgG豚鼠趋化素样因子超家族成员4(CKLFSF4)酶联吸附测定试剂盒
氟离子(F-)标准溶液 500mg/L,溶剂:水Anti-Ack1(Phospho-Tyr284) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化Ack1抗体IgG豚鼠XC趋化因子受体1(XCR1)酶联吸附测定试剂盒
氟离子(F-)标准溶液 1000mg/L,体:水Anti-Phospho-Ack1(Tyr857/858) /FITC 荧光素标记兔抗人、小鼠化Ack1抗体IgG豚鼠核孔蛋白37kda(NUP37)酶联吸附测定试剂盒
金标准溶液 1000μg/mlAnti-Phospho-Ack1(Tyr326) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化Ack1抗体IgG豚鼠胃蛋白酶原A(PGA)酶联吸附测定试剂盒
金标准溶液100.0μg/g,体:0.5mol/l盐Anti-ACTH 1-39/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠ACTH抗体IgG豚鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)酶联吸附测定试剂盒
金标准溶液 100μg/mlAnti-ACTH(7-23)/FITC 荧光素标记促肾上腺皮质(7-23)抗体IgG豚鼠雌二受体(ER)酶联吸附测定试剂盒
镓标准溶液 1000μg/mlACTH(18-39)/FITC 荧光素标记ACTH(18-39)抗体IgG豚鼠晶状体蛋白αB (CRYαB)酶联吸附测定试剂盒
锗标准溶液 1000μg/mlAnti-Actin Alpha /Alpha-SMA/FITC 荧光素标记Actin α 蛋白抗体IgG豚鼠跨膜丝氨蛋白酶2(TMPRSS2)酶联吸附测定试剂盒
钆标准溶液 1000μg/mlAnti-Actin Alpha / Alpha-SMA/RBITC 红色荧光素标记肌动蛋白α抗体IgG豚鼠钙腔蛋白(CALU)酶联吸附测定试剂盒
mNSCs-11细胞线粒体呼吸链复合物VElisa试剂盒E.coli O6大肠杆体蛋白Laminin Beta 2/Laminin S 层粘连蛋白β2抗体
黄酮合成酶Elisa试剂盒普通大肠埃希体蛋白(非致病性)Laminin Beta 1 层粘连蛋白β1抗体
氨氨转移酶Elisa试剂盒EphA1-R受体抗原Laminin B2 gamma 1 层粘连蛋白B2γ1抗体
天门冬氨氨转移酶Elisa试剂盒红**素受体抗原Laminin alpha 5 层粘蛋白α5抗体
过氧还蛋白Elisa试剂盒化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗原Laminin alpha 4 层粘蛋白α4抗体(Lamininα4)
硫氧化还原蛋白Elisa试剂盒丝裂原活化蛋白激酶抗原Laminin alpha 4 层粘蛋白α4抗体(Lamininα4)
NADP-苹果脱氢酶Elisa试剂盒丝裂原活化蛋白激酶3抗原Laminin alpha 1 层粘蛋白α1抗体
甘油脱氢酶Elisa试剂盒丝裂原活化蛋白激酶4抗原Laminin 5 层粘连蛋白5(laminin γ2)抗体
胆碱加氧酶Elisa试剂盒人化雌受体α多肽抗原Laminin 2 alpha 层粘蛋白α2抗体