EJ细胞

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产品名称：膀胱癌细胞；EJ
形态特性：上皮细胞样

生长特性：贴壁生长

培养条件：RPMI1640+10%FBS

传代方法：1：2传代
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台； 

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细���：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 

碲标准溶液 100μg/ml，体:HCIAnti-APS(Ser598)/FITC  荧光素标记化APS抗体IgG豚鼠衰变加速因子(DAF)酶联吸附测定试剂盒

铽标准溶液 1000μg/mlanti-AQP1/FITC  荧光素标记水通道蛋白-1抗体IgG豚鼠着丝粒蛋白B(CENPB)酶联吸附测定试剂盒

1000µg/mL，体:10%HClAnti-AQP-2/FITC  荧光素标记水通道蛋白-2蛋白抗体IgG豚鼠集落激因子2受体α (CSF2Rα)酶联吸附测定试剂盒

铥标准溶液 1000μg/mlAnti-AQP-3/FITC  荧光素标记水通道蛋白-3抗体IgG豚鼠N-乙酰半糖-6-硫酯酶(GAS)酶联吸附测定试剂盒

铥标准溶液 1000μg/mL，体：10%HCLAnti-AQP4/FITC  荧光素标记水通道蛋白-4蛋白抗体IgG豚鼠凝溶胶蛋白(GS)酶联吸附测定试剂盒

钒标准溶液1 mg/ml V(3+),溶剂:2%硝,用于 AAS Anti-AQP5/FITC  荧光素标记水通道蛋白-5抗体IgG豚鼠肾素(REN)酶联吸附测定试剂盒

钒标准溶液 1000μg/mlAnti-AQP7/FITC  荧光素标记水通道蛋白-7抗体IgG豚鼠骨成型蛋白4 (BMP-4)酶联吸附测定试剂盒

钒标准溶液 500mg/L，溶剂：水Anti-AQP9/FITC  荧光素标记水通道蛋白-9抗体IgG豚鼠α-黑色素(αMSH)酶联吸附测定试剂盒

钒标准溶液 100mg/L，体:1%HCI Anti-AR/FITC  荧光素标记雄受体抗体IgG豚鼠肌营养**蛋白(DMD)酶联吸附测定试剂盒

镱标准溶液 1000μg/mlAnti-AKR1B1/ADR/FITC  荧光素标记糖还原酶抗体IgG豚鼠C4结合蛋白α(C4BPα)酶联吸附测定试剂盒

镱标准溶液 1000μg/ml in 10%HClAnti-phospho-AR ( p-Ser580)/FITC  荧光素标记化雄受体抗体IgG豚鼠核孔蛋白205kda(NUP205)酶联吸附测定试剂盒

钇标准溶液 1000μg/ml in 10% HClAnti-AR(phospho Ser213/Ser791)/FITC  荧光素标记化雄受体抗体IgG豚鼠杀性/通透性增加蛋白(BPI)酶联吸附测定试剂盒  

钇标准溶液 1000μg/mlAnti-AR Alpha1/FITC  荧光素标记α1肾上腺素能受体抗体IgG豚鼠胃粘液素(GM)酶联吸附测定试剂盒

锌标准溶液 1000μg/mlAnti-ARC/FITC  荧光素标记ARC抗体IgG豚鼠环指蛋白4(RNF4)酶联吸附测定试剂盒

锌标准溶液 1000mg/L，溶剂：1%盐Anti-ARF6/FITC  荧光素标记ADP核糖化因子6抗体IgG豚鼠L-脱氢酶(L-LDH)酶联吸附测定试剂盒
EJ细胞硫氧化还原蛋白Elisa试剂盒生长调节致癌因α/黑素瘤生激因子α 抗原KLHL3  Kelch样蛋白3抗体

线粒体呼吸链复合物IElisa试剂盒葡萄糖调节蛋白78抗原（热休克蛋白70蛋白5）KLHL26  Kelch样蛋白26抗体

线粒体呼吸链复合物IIElisa试剂盒谷胱甘肽还原酶抗原KLHL25  Kelch样蛋白25抗体

线粒体呼吸链复合物IIIElisa试剂盒A型人流感病H1N1-M2蛋白多肽KLHL24  Kelch样蛋白24抗体

线粒体呼吸链复合物IVElisa试剂盒A型猪流感病H1N1-M2蛋白KLHL23  Kelch样蛋白23抗体

总抗氧化能力Elisa试剂盒流感病A抗原KLHL22  Kelch样蛋白22抗体

超氧阴离子Elisa试剂盒流感病A抗原KLHL21  Kelch样蛋白21抗体

总蛋白酶Elisa试剂盒组蛋白H2AX多肽抗原KLHL20  Kelch样蛋白20抗体

总蛋白酶Elisa试剂盒流感病A抗原KLHL14  Kelch样蛋白14抗体