产品名称:黑素瘤细胞;WM-26C-L4
生长特性:贴壁生长
培养条件:DMEM(高糖)+10%FBS
传代方法:1:2传代
产品名称
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规格
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货号
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WM-26C-L4细胞
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T25
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FS-X3373
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冻存培养基:
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案:
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
实验材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个;
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个,细胞培养瓶1个
5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块;
7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;
8、酒精灯1台;
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
水质钡标样 浓度范围:0.834(mg/L),分析标准品Anti-ATRN/FITC 荧光素标记吸引素抗体IgG鸡碱性成纤维生长因子(bFGF/FGF2)酶联吸附测定试剂盒
联标准溶液 1000μg/ml,溶剂:Anti-ATX/Autotaxin/E-NPP2/FITC 荧光素标记自运动因子抗体IgG鸡C-反应蛋白(CRP)酶联吸附测定试剂盒
邻二丁苄酯标准溶液 1000μg/ml,溶剂:Anti-ATXN1/Ataxin 1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠失调症蛋白1抗体IgG鸡雌二(E2)酶联吸附测定试剂盒
标准溶液 506ug/ml,溶剂:Anti-Ataxin-1(phospho Ser776)/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化失调症蛋白1抗体IgG鸡表皮生长因子(EGF)酶联吸附测定试剂盒
标准溶液 1000μg/ml,溶剂:二硫化碳Anti-AU5 tag/FITC 荧光素标记AU5 tag标签抗体IgG鸡趋化因子C-C-元配体1(CCL1)酶联吸附测定试剂盒
标准溶液 1000μg/ml,溶剂:Anti-AU1 tag/FITC 荧光素标记抗AU1 tag标签抗体IgG鸡黑色素瘤关联硫软骨素蛋白聚糖(MCSP)酶联吸附测定试剂盒
标准溶液0.96mg/ml,溶剂:Anti-Aurora A /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠、牛、兔、马、猪有丝分裂激酶A抗体IgG鸡脂爬行酶2(PLSCR2)酶联吸附测定试剂盒
水质生化需氧量标样 浓度范围:61.8-148(mg/L),分析标准品Anti-Phospho-Aurora A (p-Thr288) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化有丝分裂激酶A抗体IgG鸡褪黑素(MT)酶联吸附测定试剂盒
水质总铍标样 分析标准品Anti-Aurora B/FITC 荧光素标记光激酶B抗体IgG鸡细丝蛋白Bβ(FLNβ)酶联吸附测定试剂盒
水质溴标样 分析标准品Anti-Phospho-Aurora B (Thr232)/Aurora C (Thr198) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化有丝分裂激酶B/C抗体IgG鸡白介素4(IL-4)酶联吸附测定试剂盒
水质标样 分析标准品Anti-Aurora A/Aurora B/Aurora C /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠有丝分裂激酶A、B、C抗体IgG鸡肌球蛋白轻链9(MYL9)酶联吸附测定试剂盒
中系物混合标样 分析标准品Anti-Aurora C /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠、牛、兔、猪有丝分裂激酶B抗体IgG鸡CCAAT增强子结合蛋白ε(C/EBPε)酶联吸附测定试剂盒
二硫化碳中系物混合标样 110μg/mlAnti-AVEN/FITC 荧光素标记凋亡、半胱蛋白酶激活抑制剂抗体IgG鸡β葡萄糖酶(GUSβ)酶联吸附测定试剂盒
铜标准溶液1.0mg/l,水质标样Anti-AVPR2/FITC 荧光素标记精氨加压素受体2抗体IgG鸡组氨丰富糖蛋白(HRG)酶联吸附测定试剂盒
铜标准溶液 1000mg/l,溶剂:1%硫Anti-Axin1/FITC 荧光素标记轴蛋白1Axin protein 1抗体IgG鸡脂酰肌蛋白聚糖2(GPC2)酶联吸附测定试剂盒
WM-26C-L4细胞当量抗氧化能力Elisa试剂盒人α亚人绒毛膜促性腺多肽抗原KLF8/KLF3 KLF样转录因子8抗体
抗亚油氧化能力Elisa试剂盒膀胱肿瘤抗原KLF6/PAC1 转染抑癌因KLF6抗体
DPPH自由能力Elisa试剂盒c-erbB-2受体抗体(N端)KLF5/UKHC 驱动蛋白KIF5B抗体
铁氧还原能力Elisa试剂盒c-erbB-2受体抗原(N端)KLF4 肠道内富含的Kruppel样因子/上皮锌指蛋白4抗体
8-羟脱氧鸟苷Elisa试剂盒肝生长因子抗原KLF2 肺Kruppel样因子抗体
β-羟丁脱氢酶Elisa试剂盒人类疱疹病8抗原KLF13/RFLAT-1 肠道内富含的Kruppel样因子13
芪合酶Elisa试剂盒人类疱疹病8抗原KLC1/KNS2 驱动蛋白2抗体
腺苷二葡萄糖焦化酶Elisa试剂盒人类疱疹病8抗原KIZUNA/C20orf19 20号染色体开放阅读框19抗体
不溶性性转化酶Elisa试剂盒缺氧诱导因子1β 抗原KIST/UHMK1 丝氨/苏氨蛋白激酶KIST抗体(激酶相互作用与白血病相关因)
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