实验材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个，细胞培养瓶1个
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块；
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；
8、酒精灯1台；
|
产品名称
|
规格
|
货号
|
|
HTR-8/SVneo细胞
|
T25
|
FS-X3377
|
产品名称：滋养细胞；HTR-8
形态特性：上皮样
生长特性：贴壁生长
培养条件：DMEM/F12+15%FBS
传代方法：1：2传代
公司细胞现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
冻存培养基：
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
邻二二异辛酯 标准溶液1000μg/ml，溶剂：Anti-Bim/FITC 荧光素标记死亡调解子抗体IgG鸡脾脏酪氨激酶(SYK)酶联吸附测定试剂盒
邻二二异辛酯 标准溶液500μg/ml，溶剂：Anti-phospho-Bim(Ser55) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化死亡调解子抗体IgG鸡胸腺嘧啶核苷化酶(TP)酶联吸附测定试剂盒
中标样 分析标准品Anti-Bim(phospho Ser87)/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化死亡调解子抗体IgG鸡GATA结合蛋白3(GATA3)酶联吸附测定试剂盒
2,4-二硝标准溶液 1000μg/ml,溶剂：Anti-phospho-Bim(Ser69) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化死亡调解子抗体IgG鸡糖化脂酰肌特异性脂酶D1(GPLD1)酶联吸附测定试剂盒
标准溶液 100μg/ml，溶剂：（剧品）Anti-BIRC5/FITC 荧光素标记凋亡抑制因子5抗体IgG鸡IX型胶原α3 (COL9α3)酶联吸附测定试剂盒
中标样 分析标准品（剧品）Anti-CD203c/FITC 荧光素标记CD203c抗体IgG鸡脂质运载蛋白2(LCN2)酶联吸附测定试剂盒
异辛烷中o, p’-DDT标样 标称值单位：100μg/mL，分析标准品Anti-CD203c/RBITC 红色荧光素罗丹明(RBITC)标记抗CD203c抗体IgG鸡素β受体(LTβR)酶联吸附测定试剂盒
异辛烷中p, p’-DDT标样 浓度的标称值单位：98ug/mL，分析标准品Anti-BNP/HRP 辣根过氧化物酶标记兔抗人脑钠素抗体IgG鸡糖抗原125(CA125)酶联吸附测定试剂盒
p, p’-DDD标准溶液101.5mg/L,溶剂:异辛烷Anti-CD31/HRP 辣根过氧化物酶标记CD31抗体IgG鸡线粒体肌激酶1B(CKMT1B)酶联吸附测定试剂盒
2,3-二酚标准溶液 1000μg/ml,溶剂：Anti-BK channel/FITC 荧光素标记BK通道蛋白抗体IgG鸡血小板衍生生长因子C(PDGFC)酶联吸附测定试剂盒
2,4-二酚标准溶液 1000μg/ml,溶剂：Anti-BKCa channels/FITC 荧光素标记钙激活通道蛋白抗体IgG鸡山梨脱氢酶(SDH)酶联吸附测定试剂盒
2,5-二酚标准溶液 1000μg/ml，溶剂：Anti-Bmi1/PCGF4/FITC 荧光素标记组蛋白相关Bmi1抗体IgG鸡脂酰肌特异性脂酶Cγ2(PLCγ2)酶联吸附测定试剂盒
3,4-二酚标准溶液 1000μg/ml,溶剂：Anti-BLAME/SLAMF8/FITC 荧光素标记BLAME抗体IgG鸡单核趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)酶联吸附测定试剂盒
3,5-二酚标准溶液 1000μg/ml，溶剂：Anti-BLNK/B-cell linker protein /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠T连接蛋白抗体IgG鸡外信号调节激酶(ERK)酶联吸附测定试剂盒
邻二二乙酯标准溶液 1000μg/ml，溶剂：Anti-Phospho-BLNK(p-Tyr96) /FITC 荧光素标记兔抗人化T连接蛋白抗体IgG鸡活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)酶联吸附测定试剂盒
HTR-8/SVneo细胞脂肪去饱和酶Elisa试剂盒丝氨蛋白酶/线粒体丝氨蛋白酶多肽抗原Keratan Sulfate 硫角质素抗体
N-乙酰葡糖Elisa试剂盒离子钙接头蛋白抗原KEAP1/KLHL19 胞质接头蛋白Keap1抗体
核酮糖激酶Elisa试剂盒小肠型脂肪结合蛋白抗原KDM5C/Jarid1C/SMCX 组蛋白去化Jarid1C抗体
神经酰Elisa试剂盒干扰素诱导跨膜蛋白1抗原KDM5B/PLU1/Jarid1B 组蛋白去化酶JARID1B抗体
神经鞘氨Elisa试剂盒干扰素-α抗原（人）KDM4C/GASC1/JMJD2C 鳞状癌增强蛋白1抗体
1鞘氨Elisa试剂盒干扰素-gamma受体1抗原KDM1 组蛋白赖氨特异性脱酶1抗体
鞘脂Elisa试剂盒胰岛素样生长因子结合蛋白-2（多肽）KDEL (ER Marker) 赖氨，天冬氨，谷氨，亮氨相关序列抗体
酯酰ACP硫酯酶Elisa试剂盒胰岛素样生长因子结合蛋白-3抗原KCTD5 离子通道四聚体结构域蛋白5抗体
脂二酰甘油酰转移酶Elisa试剂盒胰岛素样生长因子2 mRNA 结合蛋白3抗原KCTD12 离子通道多聚体结构域蛋白12抗体
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
- 温馨提示：为规避购买风险，建议您在购买前务必确认供应商资质与产品质量。
- 免责申明：以上内容为注册会员自行发布，若信息的真实性、合法性存在争议，平台将会监督协助处理，欢迎举报